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文檔簡介
1、目的:旨在探討硼替佐米對小鼠成肌細(xì)胞系C2C12的生長和分化的影響并探索影響過程中參與的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路。
方法:
(1)利用低濃度馬血清(2%)體外誘導(dǎo)細(xì)胞分化,吉姆薩染色后顯微鏡觀察;
?。?)吉姆薩染色觀察硼替佐米對C2C12細(xì)胞分化的影響;
?。?)MTT法檢測硼替佐米對C2C12細(xì)胞增殖的影響;
?。?)利用流式細(xì)胞術(shù)檢測硼替佐米對C2C12細(xì)胞凋亡、周期的影響;
(5)利用免
2、疫印跡法和免疫熒光法檢測硼替佐米對C2C12細(xì)胞分化、周期及凋亡影響的作用機(jī)制。
結(jié)果:硼替佐米能抑制多核肌管的形成并伴隨著Myogenin的低表達(dá)。用不同濃度的硼替佐米處理C2C12細(xì)胞,能引起C2C12細(xì)胞增殖能力濃度依賴性的降低。Annexin V/PI染色分析顯示用硼替佐米處理C2C12細(xì)胞24h后能導(dǎo)致細(xì)胞顯著性的凋亡,Cleaved caspas-3的檢測也更加證實(shí)了這一點(diǎn)。硼替佐米引起的細(xì)胞凋亡和p-ERK蛋白表
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