Mfn2在氫氣鹽水抗肝臟缺血再灌注損傷中的作用和機制.pdf

1、目的：
　　利用大鼠肝臟部分缺血再灌注損傷模型，觀察氫氣鹽水對肝缺血再灌注損傷的保護作用，從分子水平和超微結構上研究肝缺血再灌注損傷和線粒體損傷的關系，并探討其可能的機制，為臨床肝臟外科手術后缺血再灌注損傷的防護提供理論基礎。
　　方法：
　　將健康雄性SD大鼠56只，隨機取8只為假手術組（N組），另48只隨機分為對照組（NS組）和實驗組（HS組），其中再按缺血時間分為NS1組和HS1組（缺血20min），NS2組和H

2、S2組（缺血40min），NS3組和HS3組（60min），每組8只。假手術組術前10min腹腔注射生理鹽水10ml/kg，對照組、實驗組術前10min分別腹腔注入生理鹽水10ml/kg、飽和氫氣鹽水10ml/kg。動物模型為經典肝臟缺血再灌注模型。分別以各組大鼠肝臟門靜脈復流后24h取肝臟標本及靜脈血。
　　1.運用自動生化分析儀檢測血清ALT、AST水平。
　　2.病理切片觀察肝組織形態(tài)學改變及炎癥細胞浸潤。
　　

3、3.透射電鏡觀察肝組織中線粒體形態(tài)結構改變。
　　4.實時定量PCR、Western blot檢測在肝組織中Mfn2表達變化。
　　結果：
　　1.大鼠肝臟缺血20、40、60min恢復再灌注24h后，各組血清ALT、AST水平逐漸升高，以60min升高最明顯（P<0.01）。與NS組比較，相應的HS組ALT、AST水平均明顯降低（P<0.05）。
　　2. HE染色生理 NS1、NS2組可見肝細胞明顯腫脹，脂肪

4、變性；NS3組可見少量肝細胞嗜酸性壞死及點狀壞死，匯管區(qū)有大量炎性細胞浸潤。與 NS組比較，相應的HS組肝臟細胞水腫、炎性細胞浸潤顯著減輕。
　　3.透射電鏡可以看出NS1、NS2組缺血再灌注大鼠肝細胞部分線粒體腫脹，數量減少，線粒體嵴稍減少，少數線粒體膜不完整，基質密度降低，NS3組則線粒體高度腫脹、形狀不規(guī)則，空泡形成，而且線粒體脊紊亂、短小，排列紊亂，甚至崩解，基質凝聚。內質網明顯擴張。而 HS組的大鼠肝細胞線粒體呈長柱狀或

5、網狀，大小、形態(tài)較一致，線粒體膜完整，線粒體嵴呈板層狀分布、清晰可見，較規(guī)則，基質結構較清晰。
　　4. NS3組較N組Mfn2蛋白及mRNA表達量明顯降低（P<0.01）。HS組Mfn2蛋白及mRNA表達較相應的NS組均有升高（P<0.05）。
　　結論：
　　1．氫氣鹽水對肝臟缺血再灌注的肝功能損害、肝組織及線粒體的功能形態(tài)有一定保護作用。
　　2．氫氣鹽水可促使Mfn2蛋白及RNA的表達上調，可能通過促進線