SbNHX1基因在大腸桿菌中的表達(dá)及其耐鹽性分析.pdf

1、土地鹽漬化是影響限制農(nóng)業(yè)生產(chǎn)和農(nóng)業(yè)生態(tài)環(huán)境的一個(gè)重要因素，更是一項(xiàng)世界性難題。目前，世界耕種土地的大約20％和接近一半的灌溉土地都遭到了鹽脅迫的危害。因此改善土壤環(huán)境、培育耐鹽植物，增強(qiáng)植物的耐鹽性已成為本世紀(jì)各國(guó)政府和林業(yè)領(lǐng)域的主攻方向。 北美海蓬子(SalicorniaBigeloviiTorr.)屬于藜科(Chenopodiaceae)、海蓬子屬(Salicornia)，是一種耐鹽性極強(qiáng)的真鹽生植物。其抗鹽能力超過(guò)海水鹽度

2、的20％～40％，耐鹽極限達(dá)到5％NaCl濃度，嫩莖中的可溶性鹽分含量高達(dá)37％(干重百分比)。 本研究對(duì)從北美海蓬子中分離的Na+/H+逆向運(yùn)輸?shù)鞍谆蛟谖⑸镏羞M(jìn)行了表達(dá)，并進(jìn)行了耐鹽分析。主要做了以下研究：1)利用RT-PCR從擬南芥幼苗中克隆得到AtNHX1基因；2)利用套疊PCR技術(shù)對(duì)SbNHX1基因進(jìn)行了缺失突變，得到了SbNHX1-C基因，其中從基因的C末端1353bp至1514bp，去除掉162個(gè)核苷酸；3)構(gòu)建

3、了pET-SbNHX1、pET-SbNHX1-C、和pET-AtNHX1三個(gè)原核表達(dá)載體；4)對(duì)轉(zhuǎn)基因的大腸桿菌B菌株進(jìn)行了K+、Na+、Li+、Cs+、Rb+、Ca2+和Mg2+脅迫分析。獲得了以下結(jié)果：1)證明了SbNHX1能抵抗Na+和K+的脅迫，但對(duì)其它鹽離子沒(méi)有抗性；2)證明了北美海蓬子Na+/H+逆向轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白基因(SbNHX1)C末端從基因的C末端1353bp至1514bp的序列在耐鹽中起一定的作用：3)證明了北美海蓬子Na