復方駱駝蓬子水凝膠貼劑的動物藥效學及基于微透析技術的藥動學研究.pdf

1、目的：復方駱駝蓬子軟膏是治療風濕性關節(jié)炎的傳統(tǒng)維吾爾醫(yī)藥，為改善其劑型缺陷、提高使用方便性，我們在原方的基礎上研制了復方駱駝蓬子水凝膠貼劑新制劑。本實驗研究了復方駱駝蓬子水凝膠貼劑對動物急性炎癥、慢性炎癥、疼痛、關節(jié)炎模型的作用及皮膚刺激性，并與原制劑復方駱駝蓬子軟膏進行對比，以確證水凝膠貼劑的藥效作用；同時采用微透析取樣技術研究了復方駱駝蓬子水凝膠貼劑與其軟膏的大鼠體內藥物動力學，為復方駱駝蓬子水凝膠貼劑的體內過程、透皮性能及進一步研

2、究奠定基礎。
　　方法:
　?、俨捎枚妆街滦∈蠖[脹、角叉菜膠誘發(fā)大鼠足趾腫脹及棉球誘導大鼠肉芽腫實驗，對比研究復方駱駝蓬子水凝膠貼劑及軟膏的抗炎作用；采用小鼠醋酸扭體實驗，觀察比較復方駱駝蓬子水凝膠貼劑及軟膏的鎮(zhèn)痛作用；采用完全弗氏佐劑誘發(fā)大鼠關節(jié)炎試驗，研究復方駱駝蓬子水凝膠貼劑及軟膏的抗風濕性關節(jié)炎作用；采用新西蘭兔進行復方駱駝蓬子水凝膠貼劑及軟膏的完整與破損皮膚的皮膚刺激性試驗。
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3、PLC熒光色譜法對復方駱駝蓬子水凝膠貼劑及軟膏中主要藥效成分駱駝蓬堿與去氫駱駝蓬堿的大鼠體內藥動學進行研究。自制了性能穩(wěn)定、可用于體內微透析研究的線性和柔性微透析探針，并通過體內外微透析實驗，評價其灌流速度、藥物濃度對探針取樣回收率的影響。采用該自制探針分別對大鼠皮膚和血液同步微透析取樣，聯(lián)合高效液相色譜技術實時監(jiān)測皮膚和血液中的駱駝蓬堿與去氫駱駝蓬堿的濃度變化，采用DAS2.0數(shù)據(jù)處理軟件以統(tǒng)計矩法計算藥動學參數(shù)。
　　結果:<

4、br>　　①與基質組比較，復方駱駝蓬子軟膏和水凝膠貼劑高、中、低三個劑量組均可抑制小鼠耳腫脹的急性炎癥（P<0.05），抑制角叉菜膠致大鼠腳腫脹的亞急性炎癥（P<0.05），抑制棉球致大鼠肉芽腫增生的慢性炎癥（P<0.05），抑制對醋酸所致的扭體疼痛（P<0.05）；對于慢性炎癥和亞急性炎癥，復方駱駝蓬子貼劑高、中劑量組作用優(yōu)于軟膏組（P<0.05）；對于急性炎癥和鎮(zhèn)痛作用二者作用相當；對于完全弗氏佐劑誘發(fā)大鼠關節(jié)炎的作用，病理切片顯示

5、復方駱駝蓬子軟膏的高劑量組和貼劑的中、高劑量組均有良好的作用；復方駱駝蓬子軟膏和凝膠貼劑對新西蘭家兔皮膚刺激性均輕微。
　?、诟咝б合酂晒馍V法測定大鼠體內的駱駝蓬堿與去氫駱駝蓬堿的色譜條件為：以乙腈-醋酸銨緩沖液(3.4g乙酸銨＋0.5mL冰乙酸＋500mL水)為流動相=18:82；色譜柱以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑島津ODS-C18(5μm，250mm×4.6mm)；流速1.0mL/min；進樣量：20μL；柱溫:30℃；駱

6、駝蓬堿激發(fā)波長λex=375nm，發(fā)射波長λem=470nm；去氫駱駝蓬堿激發(fā)波長λex=320nm，發(fā)射波長λem=420nm。駱駝蓬堿在0.20～412.00ng/mL內有良好的線性關系（n=7，r=0.9999）；去氫駱駝蓬堿在0.89～453.13ng/mL內有良好的線性關系（n=6，r=0.9999)。方法的專屬性、精密度、準確度、穩(wěn)定性均符合生物樣品的分析方法要求。增量法和減量法測定探針體外回收率基本一致，體內外探針回收率隨

7、著灌流速度的增加而減小，探針的回收率與藥物濃度無關，在連續(xù)取樣20h內探針回收率穩(wěn)定。復方駱駝蓬子水凝膠貼劑及其軟膏經皮給藥后，血液中駱駝蓬堿和去氫駱駝蓬堿在取樣時間內含量極低，僅有個別點能夠測出，不能表達給藥后血液中的藥代動力學特征。復方駱駝蓬子水凝膠貼劑和軟膏經皮給藥后皮膚中駱駝蓬堿的藥動學參數(shù)：Cmax分別為24.27±1.98和8.27±0.65(μg/L)，Tmax分別為13.00和13.67±0.58(h)，MRT分別為11

8、.58±0.07和10.86±0.11(h)，AUC(0-t)分別為151.25±8.10和87.43±1.77(μg·h/L)，AUC（0-∞）分別為164.26±14.11和152.19±6.57(μg·h/L)，其中Cmax、MRT、AUC(0-t)差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。貼劑和軟膏經皮給藥后皮膚中去氫駱駝蓬堿的藥動學參數(shù)：Cmax分別為80.25±9.80和60.88±3.68(μg/L)，Tmax分別為15.33±0

9、.58和15.00(h)，MRT分別為14.03±0.17和13.07±0.30(h)，AUC(0-t)分別為285.25±31.65和148.13±18.29(μg·h/L)，AUC(0-∞)分別為315.25±37.27和150.21±19.19(μg·h/L)，其中 Cmax、MRT、AUC(0-t)、AUC(0-∞)差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。
　　結論：復方駱駝蓬子水凝膠貼劑與其軟膏均具有良好的抗炎鎮(zhèn)痛作用及抗關節(jié)