腎細(xì)胞癌SOX7基因啟動(dòng)子區(qū)甲基化狀態(tài)及mRNA表達(dá)的研究.pdf

1、目的：腎細(xì)胞癌(Renal Cell Carcinoma，RCC)是起源于腎實(shí)質(zhì)泌尿小管上皮系統(tǒng)的惡性腫瘤，簡稱腎癌，其發(fā)病率約為4/10萬，嚴(yán)重威脅著我國人群的健康。其發(fā)病原因尚不明確，可能與遺傳、肥胖、吸煙、高血壓以及抗高血壓治療有關(guān)。研究發(fā)現(xiàn)表觀遺傳學(xué)改變可以影響基因的表達(dá)，而這可能與腫瘤的發(fā)生、發(fā)展有著密切的關(guān)系。目前，研究較深入的是表觀遺傳學(xué)中的基因甲基化與腫瘤間的關(guān)系。SOX7屬于SOXF亞族，參與調(diào)節(jié)多種發(fā)育過程，如脈管的

2、形成、血液的形成、肌肉的發(fā)育等。近年來有研究結(jié)果表明在肺癌、乳腺癌、肝癌等惡性腫瘤中存在SOX7基因啟動(dòng)子甲基化及SOX7mRNA表達(dá)異常，這可能是導(dǎo)致腫瘤發(fā)生以及發(fā)展的原因之一。然而目前尚無SOX7在RCC中相關(guān)報(bào)道。本研究通過特異性PCR及RT-PCR技術(shù)來分析SOX7基因異常甲基化與轉(zhuǎn)錄表達(dá)之間的關(guān)系，并通過統(tǒng)計(jì)學(xué)分析來研究SOX7基因異常甲基化與患者臨床數(shù)據(jù)之間的關(guān)系。初步探討SOX7基因異常甲基化在RCC中的作用。
　　

3、方法：
　　1.收集河北醫(yī)科大學(xué)第四醫(yī)院腎癌組織及正常組織標(biāo)本58例。采用反轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)(Reverse Transcriptase-PCR，RT-PCR)來檢測58例RCC患者癌組織及正常組織中SOX7基因表達(dá)情況。
　　2.采用甲基化特異性PCR（Methylation Specific PCR，MSP）分析58例腎癌組織及正常腎組織中SOX7基因啟動(dòng)子區(qū)的甲基化狀態(tài)。
　　3.使用統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件SPSS20.0

4、對(duì)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。
　　結(jié)果：
　　1.SOX7在RCC組織和正常組織中存在完全甲基化、不完全甲基化、完全非甲基化三種不同的甲基化狀態(tài)。
　　2.SOX7基因在RCC組織中甲基化陽性率為36.2％（21/58）高于正常組織標(biāo)本中的甲基化率陽性率10.3％（6/58），二者差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=10.86 P=0.001）；58例腎癌組織中，SOX7基因甲基化率在年齡（χ2=0.015 P=0.559）、性別

5、（χ2=0.023 P=0.547）、腫瘤大?。é?=0.037 P=0.547）、Fuhrman核分級(jí)（χ2=0.514 P=0.773）四個(gè)方面沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P值均大于0.05）；在臨床分期（Ⅰ、Ⅱ期與Ⅲ、Ⅳ期）（P=0.035）方面存在統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P值小于0.05）。
　　3.腎癌組織中SOX7基因mRNA的相對(duì)表達(dá)量為0.35±0.06，低于正常組織標(biāo)本中的相對(duì)表達(dá)量0.62±0.07，經(jīng)過統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義

6、（t=-22.679，P=<0.001）。腎癌組織中，SOX7基因的相對(duì)表達(dá)量在年齡（t=1.359 P=0.182）、性別（t=-0.490 P=0.626）、腫瘤大小（t=-1.347 P=0.183）三方面沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P值均大于0.05）；在臨床分期（Ⅰ、Ⅱ期與Ⅲ、Ⅳ期）（t=-2.254, P=0.028）方面存在統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P值小于0.05）。458例患者在腎癌組織標(biāo)本方面，甲基化陽性患者SOX7基因mRNA的相對(duì)表達(dá)量為

7、0.41±0.05，甲基化陰性患者SOX7基因mRNA的相對(duì)表達(dá)量為0.63±0.07，并且其差異存在統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t=-12.506, P=0.000）。
　　結(jié)論：
　　1.腎癌組織中SOX7基因啟動(dòng)子區(qū)高甲基化是頻發(fā)事件，并且腎癌組織中 SOX7基因的甲基化率明顯高于正常腎組織，提示SOX7基因的異常甲基化可能是腎癌發(fā)生的主要機(jī)制之一。
　　2.腎癌組織中SOX7基因mRNA的相對(duì)表達(dá)量較正常組織低，提示SOX7基