煙草種子油的毒理學(xué)評(píng)價(jià)及降脂功能研究.pdf

1、目的：對(duì)煙草種子油的急性毒性、遺傳毒性及30d喂養(yǎng)試驗(yàn)毒性進(jìn)行評(píng)價(jià)，并探討煙草種子油對(duì)高脂模型大鼠的降脂作用。
　　方法：
　　1、運(yùn)用霍恩氏法，對(duì)小鼠進(jìn)行急性經(jīng)口毒性試驗(yàn)，計(jì)算煙草種子油對(duì)小鼠的半數(shù)致死劑量（LD50）。
　　2、采用Ames試驗(yàn)，觀察不同煙草種子油劑量組對(duì)鼠傷寒沙門氏菌回變菌落數(shù)的影響。
　　3、進(jìn)行骨髓嗜多染紅細(xì)胞微核試驗(yàn)，比較不同煙草種子油劑量組對(duì)小鼠微核率的影響。
　　4、采用骨髓

2、嗜多染紅細(xì)胞染色體畸變?cè)囼?yàn)觀察并比較不同劑量煙草種子油小鼠骨髓細(xì)胞染色體畸變率的影響。
　　5、健康SD大鼠80只，雌雄各半，按體重隨機(jī)分為4組，即空白對(duì)照組，煙草種子油低、中、高劑量組（5、10、20g/(kg·bw·d)），每組雌雄各10只，將煙草種子油摻入飼料中，按體重的10％折算，將受試物劑量按每100g體重?cái)z入的量折算為飼料量，每天觀察進(jìn)食及活動(dòng)情況，每周稱體重并記錄食物攝入量。30天后，禁食12h，大鼠稱重后給予戊巴比

3、妥鈉60mg/kg麻醉，腹主動(dòng)脈取血，測(cè)定血常規(guī)及血液生化指標(biāo)；留取完整肝臟、腎、脾、睪丸、卵巢稱重，計(jì)算臟體比，HE染色觀察以上組織的病理學(xué)改變，觀察有無(wú)病變。
　　6、60只SPF級(jí)SD大鼠按體重隨機(jī)分為5組，A組為基礎(chǔ)對(duì)照組，2ml/(kg·bw·d)蒸餾水灌胃；B組為高脂對(duì)照組，2ml/(kg·bw·d)蒸餾水灌胃；。C、D、E為煙草種子油低、中、高劑量組，灌胃給予煙草種子油2、4、6ml/(kg·bw·d)，除A組給予基

4、礎(chǔ)飼料喂養(yǎng)外，其余各組均飼喂高脂飼料，共持續(xù)6周。于末次灌胃并禁食12h后，按體重給予戊巴比妥鈉60mg/kg麻醉，測(cè)量體長(zhǎng)并稱重，計(jì)算Lee’s指數(shù)，腹主動(dòng)脈取血，檢測(cè)大鼠血清生化指標(biāo)的濃度并計(jì)算動(dòng)脈粥樣硬化指數(shù)（AI），分離肝組織及腎周、生殖器周圍、腸系膜周圍脂肪，計(jì)算體脂比，留取肝臟組織，HE染色觀察肝臟組織的病理學(xué)改變。
　　結(jié)果：
　　1、小鼠急性經(jīng)口毒性試驗(yàn)：14d內(nèi)未見(jiàn)有中毒和死亡現(xiàn)象，LD50>21,500m

5、g/kg。
　　2、受試樣品各劑量組回變菌落數(shù)均未超過(guò)自發(fā)回變菌落數(shù)2倍，亦無(wú)劑量－效應(yīng)關(guān)系，對(duì)鼠傷寒沙門氏菌TA97、TA98、TA100、TA102四株試驗(yàn)菌株，在加與不加S-9時(shí)，均未呈現(xiàn)遺傳毒性。
　　3、環(huán)磷酰胺陽(yáng)性對(duì)照組微核率明顯高于陰性對(duì)照組(P<0.05)，煙草種子油各劑量組的微核率均低于環(huán)磷酰胺陽(yáng)性對(duì)照組（P<0.05）。
　　4、雌、雄小鼠煙草種子油各劑量組的染色體畸變率相比陽(yáng)性對(duì)照組顯著降低（P<

6、0.05），陽(yáng)性對(duì)照組染色體畸變率相比陰性對(duì)照組顯著升高(P<0.05)。
　　5、30d喂養(yǎng)結(jié)束后，未見(jiàn)試驗(yàn)動(dòng)物有中毒及死亡狀況，體重、食物利用率、臟體比與對(duì)照組相比無(wú)明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)；各組血常規(guī)及血液生化指標(biāo)ALT、AST、BUN、Cr、GLU、ALB、TP、TC、TG均在正常范圍內(nèi)，與各自對(duì)照組相比無(wú)明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)；HE染色病理觀察顯示，除高劑量組部分肝組織可見(jiàn)少量脂肪空泡，其余各組大鼠主要臟器

7、未見(jiàn)病理學(xué)改變。
　　6、煙草種子油各劑量組脂體比均較高脂模型組有所下降；各組之間Lee’s指數(shù)均無(wú)顯著性差異；高脂模型組AI值最高，其余各組AI均顯著降低，且隨著煙草種子油劑量的升高AI值降低程度越大；與高脂模型組相比，煙草種子油低、中、高劑量組TC、LDL-C含量較高脂模型組明顯下降（P<0.05），TG含量較高脂模型組有所下降，但差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），煙草種子油高劑量組HDL-C較空白對(duì)照組明顯升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)

8、意義，其余各組無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，HE染色觀察結(jié)果顯示煙草種子油干預(yù)后，脂變細(xì)胞數(shù)量、脂肪空泡、炎性浸潤(rùn)及核溶解較高脂對(duì)照組明顯減輕。
　　結(jié)論：
　　1、根據(jù)對(duì)煙草種子油的急性經(jīng)口毒性試驗(yàn)、三項(xiàng)遺傳毒性實(shí)驗(yàn)及30d喂養(yǎng)試驗(yàn)的結(jié)果，證實(shí)煙草種子油在本實(shí)驗(yàn)范圍內(nèi)無(wú)明顯毒作用。
　　2、通過(guò)對(duì)高脂模型大鼠血生化指標(biāo)的檢測(cè)及病理學(xué)觀察，證實(shí)煙草種子油具有一定的降脂活性。
　　3、通過(guò)對(duì)煙草種子油的毒理學(xué)評(píng)價(jià)及降脂實(shí)驗(yàn)，結(jié)果表