小鼠胚胎極性及相關(guān)問題的研究.pdf

1、哺乳動(dòng)物早期胚胎發(fā)育機(jī)制仍然存在爭(zhēng)議。哺乳動(dòng)物囊胚形態(tài)發(fā)生有其特殊之處，囊胚中包含后期胚胎發(fā)育的胚外部分。哺乳動(dòng)物囊胚表現(xiàn)出明顯的不對(duì)稱性，包括胚胎一側(cè)的內(nèi)細(xì)胞團(tuán)和另一側(cè)被滋養(yǎng)層包圍的囊胚腔。內(nèi)細(xì)胞團(tuán)的位置，即極滋養(yǎng)層的位置決定了胚胎-胚外軸，為后期胚胎發(fā)育圖式提供了基礎(chǔ)，胚胎-胚外軸決定后期胚胎發(fā)育的背-腹軸?，F(xiàn)在存在的核心問題是囊胚的這種明顯的不對(duì)稱性是否在早期卵裂時(shí)就已經(jīng)決定?是否有某種潛在的機(jī)制決定了這種胚胎發(fā)育形式?是否和一些

2、非哺乳動(dòng)物相似，一些位置信息決定了這種胚胎發(fā)育形式?本實(shí)驗(yàn)以小鼠為實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ停脤?duì)細(xì)胞無(wú)毒的FITC標(biāo)記的右旋糖苷和TMR標(biāo)記的右旋糖苷標(biāo)記2-細(xì)胞胚胎的兩個(gè)卵裂球，跟蹤其發(fā)育命運(yùn)，來(lái)研究囊胚Em-Ab極性如何形成；通過透明帶切割、胚胎分割和嵌合胚胎制作的方法，研究精子穿入位置、早期胚胎分裂方式和胚胎極性的關(guān)系。 實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下： 1.2-細(xì)胞胚胎兩個(gè)卵裂球的后代在囊胚中分布并沒有一定的規(guī)律。它們隨機(jī)的分布在囊胚的胚胎部分和

3、胚外部分。 2.hCG后13到15小時(shí)，大多數(shù)1-細(xì)胞胚胎第一極體與精子穿入位置相鄰。 3.精子穿入位置對(duì)2-細(xì)胞胚胎卵裂球分裂順序沒有影響，含精子穿入位置的卵裂球沒有先分裂的趨勢(shì)。 4.分割2-細(xì)胞胚胎兩個(gè)卵裂球，含精子穿入位置的卵裂球在分裂能力、發(fā)育到囊胚的能力以及囊胚細(xì)胞數(shù)上沒有顯著差異。兩個(gè)含精子穿入位置卵裂球組成的嵌合胚胎在發(fā)育能力上和兩個(gè)不含精子穿入位置的嵌合胚胎沒有顯著差異。 5.3-細(xì)胞胚

4、胎分割后，大卵裂球的半胚胎和兩個(gè)小卵裂球的半胚胎經(jīng)體外培養(yǎng)后囊胚率及囊胚細(xì)胞數(shù)差異不顯著。3-細(xì)胞兩個(gè)大卵裂球制作的嵌合胚胎和四個(gè)小卵裂球制作的嵌合胚胎經(jīng)過體外培養(yǎng)后囊胚率和囊胚細(xì)胞數(shù)差異不顯著。 6.外部壓力能影響囊胚腔位置，但去除透明帶的胚胎發(fā)育到囊胚時(shí)也能形成正常的胚胎-胚外軸。 這些結(jié)果表明了小鼠胚胎極性和精子穿入位置并沒有特定關(guān)系，2-細(xì)胞時(shí)，小鼠胚胎極性并未形成。透明帶對(duì)胚體的壓力對(duì)小鼠胚胎極性形成有一定作用