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文檔簡介
1、MiRNA是內源的非編碼小RNA,長約22-23bp,可以結合到基因的3‘UTR區(qū)域,形成沉默復合物,抑制mRNA的翻譯或者降解mRNA。近些年,眾多研究都揭示了miRNA在細胞增殖、凋亡、器官發(fā)育、腫瘤的發(fā)生和轉移等眾多生命活動中起著重要作用。MiRNA-17-92是高度保守的多順反子miRNA基因簇,編碼6種miRNA,調控多種靶基因的表達,而這些靶基因在生物的發(fā)育過程起著關鍵作用,對它的深入研究有著重要意義。SEMA5A可以與它的
2、受體PLXNB3結合,參與調控軸突的導向,并與多種細胞的增殖、凋亡、細胞遷移等生理功能相關。
本研究根據(jù)生物信息學預測SEMA5A是miRNA-17-92的潛在靶基因,并通過雙熒光素酶報告基因實驗分析證明與miRNA-17-92家族成員miR-18a的相互作用。運用實時定量熒光PCR和Western Blot證明在胃癌細胞MKN45中過表達miR18a會導致SEMA5A的mRNA和蛋白水平表達的下調。細胞增殖實驗和細胞遷移實驗
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