中國(guó)南海PHAKELLIA FUSCA海綿及THEONELLA SWINHOE海綿可培養(yǎng)共生真菌種群多樣性的研究.pdf_第1頁(yè)
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1、本研究使用8種真菌分離培養(yǎng)基(馬丁培養(yǎng)基、2216素培養(yǎng)基、高氏一號(hào)培養(yǎng)基、麥芽粉培養(yǎng)基、MYPG培養(yǎng)基、察氏培養(yǎng)基、沙堡培養(yǎng)基和豆芽汁培養(yǎng)基)對(duì)中國(guó)南海Phakellia fusca海綿及Theonella swinhoe海綿的共生真菌進(jìn)行分離培養(yǎng)。根據(jù)18S rDNA片段序列信息對(duì)來自兩種海綿的共生真菌進(jìn)行了系統(tǒng)發(fā)育分析。 實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示:8種培養(yǎng)基里分菌種類最多的是馬丁培養(yǎng)基(Phakellia fusca、Theonell

2、a swinhoe海綿分別分得12、5類菌),2216素培養(yǎng)基和高氏一號(hào)培養(yǎng)基的數(shù)量次之(2216素培養(yǎng)基在Phakellia fusca、Theonella swinhoe海綿分別分得5、5類菌,高氏一號(hào)培養(yǎng)基在在Phakellia fusca、Theonella swinhoe海綿分別分得7、2類菌),而剩余的麥芽粉、MYPG、察氏、沙堡以及豆芽汁培養(yǎng)基在每種海綿分別分得1-3類菌。根據(jù)分離菌株的菌落形態(tài)特征初步得到111株菌,純化

3、培養(yǎng)后提取單菌DNA,并采用真菌18S rDNA片段的特異引物PCR擴(kuò)增,通過Taq I、Hinf I、Hae III三種限制性內(nèi)切酶對(duì)PCR產(chǎn)物進(jìn)行ARDRA酶切分型,Phakellia fusca、Theonella swinhoe海綿可培養(yǎng)真菌分別分出5種及4種型,共31株獨(dú)立菌。對(duì)31株菌的PCR產(chǎn)物測(cè)序并BLAST進(jìn)行在線序列比對(duì),從而得到這些菌株的生物學(xué)信息。 31株菌的序列分析顯示,Phakellia fusca海

4、綿可培養(yǎng)共生真菌中所有分離出的真菌屬于子囊菌門中(Ascomycota)9目14屬(外加1個(gè)未鑒定到屬)和擔(dān)子菌門(Basidiomycota)中1目1屬,Theonella swinhoe海綿可培養(yǎng)共生真菌中所有分離出的真菌屬于子囊菌門中(Ascomycota)3目5屬(外加1個(gè)未鑒定到屬)。Phakellia fusca海綿分離出的共生真菌比例最高的目為Eurotiales(n=8,34.8%)(n為分出菌的種類數(shù)),比例最高的屬為

5、Aspergillus(n=5,21.7%),Theonella swinhoe海綿分離出的共生真菌優(yōu)勢(shì)目為Eurotiales(n=5,62.5%),比例最高的屬為Aspergillus和Penicillium(均為n=2,25%)。Theonella swinhoe海綿分離出的共生真菌所屬于的3目5屬(外加1個(gè)未鑒定到屬)在Phakellia fusca海綿分離出的共生真菌中均能找到。 本研究確定了中國(guó)南海Phakellia

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