海帶中兩種植物激素的分離及其活性研究.pdf

1、對海帶(Laminaria japonica Areseh.)中的吲哚乙酸和脫落酸進(jìn)行分離純化，優(yōu)化條件，利用反相高效液相色譜(RP-HPLC)方法對它們進(jìn)行定性和定量研究，利用質(zhì)譜(APESI-MS)方法對海帶吲哚乙酸和脫落酸進(jìn)行了鑒定。在此基礎(chǔ)上，利用RP-HPLC方法，測定吲哚乙酸和脫落酸在成熟海帶的不同藻體部位中及不同生長時期的海帶中的含量，詳細(xì)研究了它們在成熟海帶中的分布及其含量與海帶不同生長時期的關(guān)系，并從生長調(diào)節(jié)作用、代謝

2、物質(zhì)含量及氧化損傷的保護(hù)作用等方面，研究了海帶吲哚乙酸和脫落酸對海洋微藻的生物學(xué)效應(yīng)。 獲得海帶吲哚乙酸的最適分離純化方法為：避光組織勻漿，勻漿液用超聲波進(jìn)行細(xì)胞破碎，90％甲醇浸提，乙醚萃取，硅膠脫色，通過Sephadex LH 20柱層析和高效液相色譜方法進(jìn)行純化。海帶脫落酸的最適分離純化方法為：組織勻漿，超聲波破碎細(xì)胞，80％甲醇浸提，乙酸乙酯萃取，硅膠脫色純化，通過Sephadex LH 20柱層析和高效液相色譜方法進(jìn)一

3、步純化。在此基礎(chǔ)上，通過RP-HPLC方法的定性分析和APESI-MS方法的分析結(jié)果確定分離目標(biāo)產(chǎn)物為吲哚乙酸和脫落酸。RP-HPLC方法的定量分析結(jié)果表明海帶吲哚乙酸的產(chǎn)量為65~95μg/kg·FW，海帶脫落酸的產(chǎn)量為65-70μg/kg·FW，該方法操作簡便，準(zhǔn)確，重現(xiàn)性好。 研究表明，成熟海帶的不同部位對于吲哚乙酸含量的影響顯著(0.01

4、部位對于脫落酸含量的影響并不顯著(p<0.05)。海帶的不同生長時期對全海帶中吲哚乙酸和脫落酸的含量影響均極顯著(p<0.01)，其中吲哚乙酸在海帶夾苗初期的幼嫩海帶中含量最高，隨著海帶成熟，其含量逐漸減少，而脫落酸含量卻逐漸增加，在成熟期的海帶中脫落酸的含量最高。 研究表明，在0～100μmaol/L濃度范圍內(nèi)，海帶吲哚乙酸對小球藻、鹽藻和紫球藻的生長均有促進(jìn)作用；而角毛藻在外加海帶吲哚乙酸的濃度≥75μmoI/L時，細(xì)胞生長

5、被抑制。在0～200 pmol/L濃度范圍內(nèi)，海帶脫落酸對小球藻、鹽藻、球等鞭金藻和紫球藻四種海洋微藻的生長均表現(xiàn)出抑制作用，脫落酸濃度對四種海洋微藻的生長影響均顯著(0.01

6、白和葉綠素含量影響均不顯著：對于小球藻胞內(nèi)可溶性蛋白和葉綠素的含量影響顯著(0.010.05)。海帶脫落酸對紫球藻胞內(nèi)可溶性蛋白及胞內(nèi)可溶性糖含量影響均極顯著(0.0010.05)；對小球藻胞內(nèi)可溶性蛋白含量影響顯著(0.0l