富血小板血漿對(duì)腦損傷合并失血性休克大鼠的腦保護(hù)作用研究.pdf

1、背景與目的：
　　背景：創(chuàng)傷性腦損傷（ traumatic brain injury, TBI）合并失血性休克（hemorrhagic shock，HS）時(shí)傷勢(shì)嚴(yán)重復(fù)雜，病情變化迅速，致傷24h內(nèi)的死亡率高達(dá)56％，早期及時(shí)有效的液體復(fù)蘇對(duì)挽救患者生命起著至關(guān)重要的作用。目前常用的復(fù)蘇液體存在一些弊端，晶體液的大量輸注會(huì)引起細(xì)胞外水腫、酸中毒等；有研究發(fā)現(xiàn)普通膠體液會(huì)引起凝血機(jī)制障礙的風(fēng)險(xiǎn)，并不能改善患者預(yù)后，尤其是對(duì)腦組織的保護(hù)

2、作用不明顯。理想的液體復(fù)蘇應(yīng)在維持機(jī)體重要臟器灌注的同時(shí)減輕腦水腫，延緩原發(fā)性神經(jīng)損害，阻止繼發(fā)性損傷。各國學(xué)者都在積極探索較為適宜的復(fù)蘇策略，Hwabejire J O采用新鮮冰凍血漿（fresh frozen plasma, FFP）復(fù)蘇腦損傷合并失血性休克豬模型發(fā)現(xiàn)FFP通過改善腦灌注，減少谷氨酸鹽介導(dǎo)的神經(jīng)毒性發(fā)揮腦保護(hù)作用。富血小板血漿(platelet-rich plasma, PRP)較新鮮冰凍血漿富含大量的血小板及生長(zhǎng)因

3、子，廣泛應(yīng)用于心臟外科手術(shù)及骨組織和軟組織的缺損修復(fù)等，一些研究還發(fā)現(xiàn)富血小板血漿對(duì)神經(jīng)擠壓損傷具有治療作用。但PRP作為復(fù)蘇液體對(duì)TBI合并HS的效果及對(duì)腦保護(hù)作用尚不明確。本研究采用PRP治療TBI合并HS大鼠，評(píng)估對(duì)腦水腫、血腦屏障功能、血流動(dòng)力學(xué)、損傷區(qū)炎癥因子、動(dòng)脈血?dú)饧皩?duì)海馬區(qū)域神經(jīng)細(xì)胞生存狀況的影響。目的：探討富血小板血漿對(duì)腦損傷合并失血性休克大鼠的腦保護(hù)作用。
　　材料與方法：
　　125只雌性成年的健康的S

4、D大鼠,選取其中25只分別制備新鮮冰凍血漿和采用Aghaloo法制備富血小板血漿，并分別檢測(cè)兩者理化指標(biāo)；將100只健康成年雌性SD大鼠隨機(jī)分為4組,每組25只：假手術(shù)組(sham組)，生理鹽水復(fù)蘇組(vehicle組)，新鮮冰凍血漿復(fù)蘇組(FFP組)，富血小板血漿復(fù)蘇組(PRP組)；sham組僅開放顱骨骨窗，余三組采用Feeney改良法制作創(chuàng)傷性顱腦損傷模型，結(jié)合Wiggers改良法制作失血性休克模型。模型制作完成60min后，veh

5、icle組復(fù)蘇采用3倍失血量的生理鹽水，F(xiàn)FP組、PRP組分別給予同量失血量FFP與PRP進(jìn)行復(fù)蘇。復(fù)蘇期檢測(cè)大鼠血流動(dòng)力學(xué)、血?dú)馇闆r；比較復(fù)蘇后24h生存率，血腦屏障通透性檢測(cè)采用伊文氏藍(lán)（EB）染色法，Elisa測(cè)定炎癥因子IL-1、IL-6及 TNF-β的表達(dá)及干濕重法測(cè)量腦水腫；mNSS評(píng)分及平衡木實(shí)驗(yàn)檢測(cè)大鼠神經(jīng)功能障礙改善情況，復(fù)蘇后7d時(shí)尼氏染色腦組織切片觀察海馬CA3區(qū)神經(jīng)元細(xì)胞生存。
　　結(jié)果：
　　大鼠富

6、血小板血漿中血小板濃度為(1857.9±278.30)×109/L，是大鼠全血血小板的6.14倍。vehicle組復(fù)蘇90min時(shí)MAP為25mmHg，PRP組保持在70mmHg左右，F(xiàn)FP組為66mmHg，低于PRP組（F=46.00，p≤0.05）。血?dú)夥治霰容^發(fā)現(xiàn)90min時(shí)PRP組血乳酸為2.90 mmol/L，低于vehicle組(4.55 mmol/L)與FFP組（3.8 mmol/L）（F=152.10，p≤0.05）。2

7、4h大鼠生存分析結(jié)果顯示sham組、vehicle組生存率分別為100%、39.70%，F(xiàn)FP組、PRP組生存率分別為63.89%、78.78%，高于vehicle組（p≤0.05）。復(fù)蘇后24h時(shí)各組IL-1表達(dá)FFP組、PRP組明顯低于vehicle組，PRP組與FFP組相比IL-1表達(dá)呈下降趨勢(shì)（t=82.343， p≤0.05）；IL-6表達(dá)PRP組低于FFP組、vehicle組（t=10.98，p≤0.05）；TNF-β表達(dá)P

8、RP組明顯低于vehicle組（t=4.274，p≤0.05）。復(fù)蘇24h時(shí)vehicle組EB含量為sham組約9倍（t=38.20，p≤0.05），PRP組 EB含量明顯低于 FFP組（t=10.65，p≤0.05）；在復(fù)蘇后1d各實(shí)驗(yàn)組腦組織含水量明顯低于 vehicle組（F=134.12，p≤0.05）。mNSS評(píng)分、平衡木實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示7d時(shí)PRP組優(yōu)于FFP組與vehicle組（p≤0.05）。尼氏染色發(fā)現(xiàn)vehicle組、