白血病的出生前起源和出生后的骨髓微環(huán)境起源.pdf

1、人類白血病是一個多步驟并且逐漸演化的過程。目前，通過對大量的人類白血病樣本進行基因表達譜分析，白血病因此得到有效的分類和生物學(xué)研究。部分研究人員還報道了從病人標(biāo)本中直接獲取白血病干細胞（LSCs)特異的基因表達譜，所有這些在不同細胞群體之間比較基因表達譜的研究都是基于細胞表面的免疫分子的表達。然而，隨著移植模型的發(fā)展，許多之前被認為不含有LSCs的細胞群，也能在小鼠體內(nèi)重建[1]。因此，用免疫表型來界定細胞群體或者鑒定白血病表型，并不能

2、真實反映白血病的發(fā)展進程，更不能反映白血病的起源[2]。研究白血病細胞的起源，在早期臨床診斷和遏制白血病惡性程度方面有重要意義，也可為白血病高風(fēng)險人群提供預(yù)防性的治療意見。本課題主要研究了白血病的出生前起源和出生之后的骨髓微環(huán)境起源。
　　1.出生前起源
　　Fev(也被稱為petl)是最近發(fā)現(xiàn)的ETS家族的轉(zhuǎn)錄因子[3]。我們的合作者闡述了Fev在斑馬魚中對胚胎造血干細胞的生成發(fā)揮著重要作用[4]，這提示Fev基因可能在高

3、等動物血液系統(tǒng)中同樣具有非常重要的作用。在前期的實驗中，我們檢測Fev在人類不同發(fā)育階段的干/祖細胞造血細胞群中的表達情況，結(jié)果發(fā)現(xiàn)Fev只在出生前的造血干/祖細胞中表達，在新生嬰兒血液系統(tǒng)和成年人骨髓造血系統(tǒng)不表達。隨后個我們又檢測了Fev在小鼠出生前和出生后的造血細胞中的表達情況，結(jié)果與人類造血系統(tǒng)表達譜相同，即是Fev在出生前的造血系統(tǒng)表達并行調(diào)控造血干細胞的自我更新，在出生后的造血細胞中沉默。有趣的是，在一些急性髓細胞白血?。ˋ

4、ML)和急性淋巴細胞白血?。ˋLL)臨床病人血樣中，我們檢測到Fev的重新表達，但是這種重新表達并沒有顯著的譜系特征。
　　Fev在某些白血病中的重新表達提示我們Fev可以作為一個標(biāo)志基因來研究白血病的出生前。為了進一步研究病人白血病細胞中表達的Fev是由出生前的造血干細胞保留而來還是由出生后的血干細胞重新激活，我們分別在出生前和出生后的造血干/祖細胞中表達MLZ-JF9或者白血病致病基因，檢測不同起源的白血病細胞中Fev的表達情

5、況。結(jié)果提示白血病干細胞中Fev調(diào)控的自我更新能力不是發(fā)病過程中重新激活的，而是從胎肝造血干細胞中保留而來。
　　2.出生后的骨髓微環(huán)境起源
　　TEL-AML/融合基因在兒童白血病中非常常見，遺傳學(xué)研究顯示，約25%的兒童急性淋巴系白血?。ˋLL)患者存在t(12;21)染色體異位[5,6]。含有TEUML/融合基因的ALL患兒中，在CD34+CD38_CD19+細胞群中能夠檢測到ZEZ-4MZ/融合基因，但是在CD34+

6、CD38- CD19_的細胞群卻檢測不到ZEZ-AML1,說明在此類型ALL中，正常造血干細胞（HSCs)并沒有受到影響，同時CD34+CD38-CD19+在正常骨髓中并不存在。CD34+CD38-CD19+細胞群能夠在小鼠體內(nèi)多次重建，說明該群細胞可以作為腫瘤起始細胞。因此，TEL-AML1是來源于胚胎時期的起始突變，可形成由前白血病干細胞維持的前白血病克隆。
　　為了研究骨髓微環(huán)境對白血病發(fā)生的影響，我們構(gòu)建了TEL-AML7