地黃提取物抑制斑馬魚的攝食性肥胖的研究.pdf

1、肥胖是由脂肪堆積而造成的一種慢性疾病。肥胖有可能導(dǎo)致體內(nèi)脂肪代謝的紊亂，嚴重影響人們的生活質(zhì)量和健康水平。預(yù)防和治療肥胖的藥物和保健品的研制已經(jīng)得到高度重視。但目前治療肥胖癥的有效并且安全的藥物并不多。地黃是一種傳統(tǒng)的中藥，在我國大部分地區(qū)都有種植，有清熱涼血、強身健體等功效。有研究表明，地黃提取物對體外培養(yǎng)的脂肪細胞的分化和生成有抑制作用，但相關(guān)的體內(nèi)實驗研究還比較有限。本論文選用高脂攝食誘導(dǎo)的肥胖斑馬魚作為模型，研究了地黃提取物對抑

2、制斑馬魚肥胖的作用。
　　首先，本文探討了地黃水提取物和地黃乙醇提取物對斑馬魚體重、體長和體高等形態(tài)指標影響。實驗把雌性斑馬魚和雄性斑馬魚分別設(shè)置為低脂喂食組(non-DIO)、高脂喂食組(DIO)、高脂喂食+地黃水提物組(DIO+water)和高脂喂食+地黃乙醇提物組(DIO+alcohol)。統(tǒng)計發(fā)現(xiàn)，無論是在雄性斑馬魚還是在雌性斑馬魚中，高脂喂食組(DIO)的體重、體長、體高都顯著的高于低脂喂食組(non-DIO)，這說明高

3、脂攝食成功誘導(dǎo)了肥胖斑馬魚模型;還發(fā)現(xiàn)，在雄性斑馬魚中，無論高脂喂食+地黃水提物組(DIO+water)還是高脂喂食+地黃乙醇提物組(DIO+alcohol)在體重、體長、體高上都顯著低于高脂喂食組(DIO)，說明無論是地黃水提物還是地黃乙醇提物都能顯著抑制雄性斑馬魚的肥胖。
　　其次，本文探討了地黃水提取物和地黃乙醇提取物對斑馬魚生化指標的影響。實驗發(fā)現(xiàn)，高脂喂食組(DIO)血清中甘油三脂(TG)和膽固醇(TC)的濃度顯著高于低

4、脂喂食組(non-DIO);高脂喂食+地黃水提物組(DIO+water)和高脂喂食+地黃乙醇提物組(DIO+alcohol)血清中甘油三酯(TG)和膽固醇(TC)的濃度顯著低于高脂喂食組(DIO)，說明地黃水提物和地黃乙醇提物都能降低攝食誘導(dǎo)的肥胖斑馬魚血清中甘油三酯和膽固醇的濃度。由于肥胖可能會影響機體的免疫系統(tǒng)，我們又檢測了地黃提取物對抗氧化酶系統(tǒng)的影響。實驗發(fā)現(xiàn)，高脂喂食組(DIO)與低脂喂食組(non-DIO)相比，SOD、GP

5、X、CAT酶活性都顯著下降;無論是高脂喂食+地黃水提物組(DIO+water)還是高脂喂食+地黃乙醇提物組(DIO+alcohol)，與高脂喂食組(DIO)相比，SOD、GPX、CAT酶活力都顯著升高，說明地黃水提物和地黃乙醇提物能顯著改善肥胖斑馬魚體內(nèi)SOD、GPX、CAT酶的活性，增強肥胖斑馬魚的非特異性免疫功能。
　　再次，本文探討了地黃水提取物和地黃乙醇提取物對斑馬魚肥胖相關(guān)基因表達的影響。實驗發(fā)現(xiàn)，CD36、GalR1a

6、、SCD1基因在高脂喂食組(DIO)中的表達顯著高于低脂喂食組(non-DIO)，而leptin、Gpr84、LPL基因在高脂喂食組(DIO)的表達顯著低于低脂喂食組。地黃提取物則能夠顯著下調(diào)CD36、GalR1a、SCD1基因的表達，上調(diào)leptin、 Gpr84、LPL基因的表達，表明地黃提取物能有效調(diào)控斑馬魚肥胖相關(guān)基因的表達。由于脂肪組織與免疫反應(yīng)有著密切的聯(lián)系，本實驗又檢測了地黃提取物對斑馬魚腫瘤壞死因子-α（TNF-α）表達

7、的影響。發(fā)現(xiàn)TNF-α基因在高脂喂食組(DIO)中的表達顯著低于其在低脂喂食組(non-DIO)中的表達;同時，無論是在高脂喂食+地黃水提物組(DIO+water)還是在高脂喂食+地黃乙醇提物組(DIO+alcohol)中，TNF-α基因都比其在高脂喂食組(DIO)中高表達，說明地黃提取物在調(diào)控斑馬魚的免疫力上可能也起重要的作用。
　　最后，本文探討了地黃提取物對斑馬魚幼魚脂滴形成的影響。本實驗選用斑馬魚胚胎，待其發(fā)育到開口吃食時

8、，分成低脂喂食組(non-DIO)、高脂喂食組(DIO)、高脂喂食+地黃水提物組(DIO+water)和高脂喂食+地黃乙醇提物組(DIO+alcohol)，喂養(yǎng)到22天時，用脂類染料尼羅紅對斑馬魚幼魚染色，在熒光顯微鏡下觀察脂滴的形成情況。結(jié)果顯示，地黃提取物能抑制斑馬魚幼魚脂滴的生成。
　　總之，我們以肥胖斑馬魚為模型，從形態(tài)指標、生化指標、分子指標等多方面證實地黃提取物可有效抑制斑馬魚的肥胖，這就使得地黃提取物在研究肥胖方面具