胚胎肝干細胞膽向分化的分子標志特征及其調(diào)控機制.pdf

1、肝臟干細胞是具有肝向和膽向分化潛能的細胞。作為“干細胞治療”隊伍中的重要成員，肝臟干細胞引起了人們極大的關(guān)注和需求，但肝臟干細胞的分化特性及其調(diào)控依然是制約肝臟干細胞臨床治療的應用瓶頸。為解析肝臟干細胞的分化決定和分化定向及其調(diào)控機制，在本研究中，我們利用懸浮培養(yǎng)法富集了胚胎妊娠期12.5天小鼠胎肝中的成球細胞，發(fā)現(xiàn)這群肝細胞球來源的細胞同時兼具肝臟干細胞和間質(zhì)細胞的特征和分化潛能，提示其為早期胎肝中處于上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化（epitheli

2、al-mesenchymal transition,EMT）狀態(tài)的胚胎肝臟干細胞群體。該群體可分為Dlk1+和Dlk1-兩個細胞亞群，鑒于膜表面型Dlk1（membrane-bound Dlk1,Dlk1M）和分泌型Dlk1（secretory Dlk1,Dlk1S）兩種異構(gòu)體的存在，我們隨后研究發(fā)現(xiàn)，Dlk1+細胞同時表達Dlk1M和Dlk1S，Dlk1-細胞僅表達 Dlk1S。進一步研究表明Dlk1+細胞可丟失Dlk1M轉(zhuǎn)變?yōu)镈lk

3、1-細胞，Dlk1-細胞仍保持細胞增殖能力，但其EMT程度增加，具有了膽管前體細胞樣特性。
　　深入研究發(fā)現(xiàn)，通過構(gòu)建過表達質(zhì)粒使Dlk1-細胞重新表達Dlk1M后，其分化特征得到明顯的逆轉(zhuǎn)，表明Dlk1M具有功能性的調(diào)控作用，并且bFGF在誘導Dlk1+細胞丟失Dlk1M的轉(zhuǎn)變過程中起重要作用。此外，對Dlk1+細胞和Dlk1-細胞自噬水平的分析顯示，Dlk1+細胞在轉(zhuǎn)化為Dlk1-后，自噬水平降低，提示自噬可能在這一胚胎肝臟干