Sonic Hedgehog通過(guò)microRNA92a轉(zhuǎn)錄后調(diào)控KLF4在內(nèi)皮功能中的作用機(jī)制研究.pdf

1、Shh（Sonic hedgehog）信號(hào)通路作用于動(dòng)脈粥樣硬化病變。有研究表明microRNA-92a對(duì)于維持內(nèi)皮功能有重要作用。在人髓母細(xì)胞瘤中，Shh被證實(shí)可以調(diào)控microRNA-92a的表達(dá)。在內(nèi)皮細(xì)胞中， Shh信號(hào)通路是否能夠調(diào)節(jié)內(nèi)皮功能仍未見(jiàn)報(bào)道。本研究的目的是探討Shh信號(hào)通路在調(diào)節(jié)內(nèi)皮細(xì)胞功能中的作用機(jī)制。
　　方法與結(jié)果:在人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞（ human umbilical vein endothelial

2、cells， HUVECs)中，過(guò)表達(dá) Shh信號(hào)通路可以上調(diào)microRNA-92a的表達(dá)水平,下調(diào)KLF4（krüppel-like factor-4）的表達(dá)水平。反之，敲低Shh信號(hào)通路可以使microRNA-92a的表達(dá)水平下降和KLF4的表達(dá)水平升高，說(shuō)明了Shh信號(hào)通路可以調(diào)控KLF4的表達(dá)。計(jì)算機(jī)軟件預(yù)測(cè)到在KLF4的3’端非編碼區(qū)（3’-untranslated region,3’UTR）存在兩個(gè)高度保守的microRN

3、A-92a的結(jié)合位點(diǎn)。我們應(yīng)用熒光素酶報(bào)告基因證實(shí)了在microRNA-92a上存在與KLF4的3’端非編碼區(qū)序列結(jié)合的特殊結(jié)合位點(diǎn)。下調(diào)microRNA-92a可以使KLF4，內(nèi)皮型一氧化氮合酶（eNOS）以及血栓彈力蛋白在蛋白及mRNA水平的表達(dá)均升高。另外，我們把 Shh-cDNA和 anti-miR-92a共轉(zhuǎn)染到HUVEC中，與只轉(zhuǎn)染Shh-cDNA的細(xì)胞相比，KLF4的蛋白表達(dá)水平恢復(fù)到正常HUVECs中KLF4的表達(dá)水平。