中國(guó)人群中ZMIZ1、GDNF基因多態(tài)性與2型糖尿病及代謝指標(biāo)的相關(guān)性研究.pdf

1、2型糖尿病是一種多基因遺傳病，遺傳因素對(duì)2型糖尿病的發(fā)病產(chǎn)生重要影響。隨著DNA測(cè)序技術(shù)不斷發(fā)展，在全世界范圍不斷發(fā)現(xiàn)新的2型糖尿病易感基因位點(diǎn)?；跉W洲人群和日本人群的研究發(fā)現(xiàn)ZMIZ1基因多態(tài)性位點(diǎn)rs12571751與2型糖尿病的發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)相關(guān)，然而未見文獻(xiàn)報(bào)道在中國(guó)人群中對(duì)該基因位點(diǎn)與2型糖尿病的相關(guān)性進(jìn)行研究。GDNF最初作為一種神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子被發(fā)現(xiàn)，然而近年來研究者們還發(fā)現(xiàn)該蛋白對(duì)胰島的發(fā)育，胰島β細(xì)胞的數(shù)量、增殖和凋亡，血糖穩(wěn)

2、態(tài)和葡萄糖耐量等都存在影響，提示GDNF基因可能參與2型糖尿病的發(fā)生發(fā)展。在GDNF的眾多SNP位點(diǎn)中，rs884344位點(diǎn)被發(fā)現(xiàn)與抑郁發(fā)病相關(guān)，提示該位點(diǎn)遺傳作用較明顯。
　　目的:
　　采用Taqman探針進(jìn)行SNP等位基因分型和統(tǒng)計(jì)學(xué)分析等方法，在中國(guó)人群中探究ZMIZ1基因rs12571751位點(diǎn)和GDNF基因rs884344位點(diǎn)的基因多態(tài)性與2型糖尿病及各項(xiàng)代謝指標(biāo)的相關(guān)性。
　　具體工作:
　　1、根

3、據(jù)研究對(duì)象的入組和排除標(biāo)準(zhǔn)，在江蘇省南京市招募本研究的受試者，共870例。根據(jù)糖尿病診斷標(biāo)準(zhǔn)，將受試者分為對(duì)照組、糖尿病前期組和2型糖尿病組。采集受試者一般臨床資料并進(jìn)行人體學(xué)測(cè)量和臨床生化指標(biāo)測(cè)定。人體學(xué)測(cè)量包括身高、體重、腰圍和臀圍，用于計(jì)算BMI和腰臀比。臨床生化指標(biāo)包括空腹血糖、餐后血糖和糖化血紅蛋白等與葡萄糖代謝相關(guān)的指標(biāo)。該部分內(nèi)容為課題組前期已完成工作。
　　2、采用血液基因組DNA提取試劑盒對(duì)受試者的血液樣本進(jìn)行D

4、NA提取，并通過微量分光光度計(jì)測(cè)試DNA的濃度和純度，OD260/OD280值的結(jié)果顯示，DNA濃度和純度較都較好。采用Taqman探針法，利用熒光實(shí)時(shí)定量PCR儀對(duì)DNA樣本進(jìn)行rs12571751位點(diǎn)和rs884344位點(diǎn)的SNP等位基因分型。SNP等位基因分型結(jié)果圖顯示，代表不同基因型的點(diǎn)呈現(xiàn)分散的三簇排列，表明Taqman探針的特異性較好，SNP等位基因分型結(jié)果準(zhǔn)確可靠。
　　3、對(duì)ZMIZ1基因多態(tài)性位點(diǎn)rs125717

5、51與2型糖尿病、各項(xiàng)代謝指標(biāo)及肥胖的相關(guān)性進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。首先統(tǒng)計(jì)納入該部分研究的受試者的一般臨床資料。然后進(jìn)行哈溫遺傳平衡檢驗(yàn)，結(jié)果顯示本研究的樣本具有較好的群體代表性。利用卡方檢驗(yàn)的方法研究rs12571751位點(diǎn)等位基因頻率和基因型分布與2型糖尿病的相關(guān)性，結(jié)果并未發(fā)現(xiàn)相關(guān)性(P＞0.05)。調(diào)整性別、年齡和BMI作為協(xié)變量，進(jìn)行多元logistic回歸，結(jié)果也顯示，該位點(diǎn)基因型分布與2型糖尿病無相關(guān)性(P=0.517，P=0.

6、755)。利用方差分析的方法研究該位點(diǎn)基因型分布與各項(xiàng)代謝指標(biāo)的相關(guān)性，結(jié)果顯示，不同基因型間BMI、腰臀比、空腹血糖、餐后血糖和糖化血紅蛋水平無顯著性差異(P＞0.05)。多元線性回歸的結(jié)果也顯示，該位點(diǎn)基因型分布與BMI(P=0.927)、腰臀比(P=0.104)、空腹血糖(P=0.858)、餐后血糖(P=0.953)和糖化血紅蛋白(P=0.981)無相關(guān)性。最后，進(jìn)行了該位點(diǎn)與肥胖的相關(guān)性研究，結(jié)果也未發(fā)現(xiàn)該位點(diǎn)與肥胖相關(guān)(P＞0

7、.05)。
　　4、采用同樣的統(tǒng)計(jì)學(xué)方法研究GDNF基因多態(tài)性位點(diǎn)rs884344與2型糖尿病、各項(xiàng)代謝指標(biāo)及肥胖的相關(guān)性。哈溫遺傳平衡檢驗(yàn)的結(jié)果表明該位點(diǎn)的樣本具有較好的群體代表性?？ǚ綑z驗(yàn)的結(jié)果顯示，rs884344位點(diǎn)等位基因頻率(P=0.484)和基因型分布(P=0.664)與2型糖尿病的發(fā)病無相關(guān)性。調(diào)整性別、年齡和BMI的多元logistic回歸結(jié)果也表明，該位點(diǎn)基因型分布與2型糖尿病的發(fā)病無相關(guān)性(P=0.603，P

8、=0.827)。方差分析的結(jié)果顯示，不同基因型間BMI、腰臀比、空腹血糖、餐后血糖和糖化血紅蛋白水平無顯著性差異(P＞0.05)。多元線性回歸的結(jié)果也表明，該位點(diǎn)基因型分布與BMI(P=0.601)、腰臀比(P=0.412)、空腹血糖(P=0.115)、餐后血糖(P=0.379)和糖化血紅蛋白(P=0.239)無相關(guān)性?？ǚ綑z驗(yàn)和多元logistic回歸的結(jié)果顯示，該位點(diǎn)基因多態(tài)性與肥胖也不存在相關(guān)性(P＞0.05)。
　　綜上所