人骨髓間充質干細胞通過SDF-1α-CXCR4軸調控胃癌KATO-III細胞生物學特性的研究.pdf

1、目的：
　　研究人骨髓間充質干細胞對胃癌KATO-III細胞生物學特性的調控機制。
　　材料與方法：
　　利用Transwell小室構建人胃癌細胞和骨髓間充質干細胞的非接觸共培養(yǎng)模型，進而將KATO-III細胞分為KATO-III細胞單獨培養(yǎng)組和KATO-III細胞與BMSCs非接觸共培養(yǎng)組，分別予以SDF-1α刺激、或/和阻滯劑(AMD3100或LY294002)阻滯。觀察SDF-1α刺激KATO-III細胞2h后的

2、刺激作用。進而觀察AMD3100或LY294002預處理KATO-III細胞30 min后，再加入SDF-1α刺激兩小時后的效應變化。此外，亦以無SDF-1α刺激為對照，由此分為不同亞組(表2)。所有檢測的目的細胞均為KATO-III細胞。采用CCK-8法檢測各組KATO-III細胞的增殖能力以及對氟尿嘧啶(5-FU)和順鉑的敏感性，Transwell小室法檢測其侵襲能力，半定量逆轉錄聚合酶鏈反應(RT-PCR)法鑒定CD133、CXC

3、R4、凋亡相關因子及上皮-間質轉化因子的表達。
　　結果：
　　與單獨培養(yǎng)相比，BMSCs可調控KATO-III細胞干細胞相關標記物的表達，促進KATO-III細胞增殖能力(P<0.05)。經(jīng)5-FU或順鉑處理后，共培養(yǎng)組的KATO-III細胞較單獨培養(yǎng)組相比抑制率顯著降低(P<0.05)。經(jīng)BMSCs調控后的KATO-III細胞穿膜細胞數(shù)高于單獨培養(yǎng)組(P<0.05)。RT-PCR檢測示BMSCs調控組CD133、CXCR

4、4、抗凋亡因子Bcl-2及N-cadherin、Snail mRNA相對輝度值顯著高于單獨培養(yǎng)組(均P<0.05)，而促凋亡因子Bax及上皮粘附因子E-cadherin表達水平降低(均P<0.05)。同時，使用AMD3100或LY294002處理BMSCs調控的KATO-III細胞，與單獨培養(yǎng)組中的調控效應類同，可顯著降低其增殖能力、耐藥能力及侵襲能力，而且CD133、CXCR4、抗凋亡因子Bcl-2、N-cadherin及Snail等