人胎盤、臍帶及骨髓源性間充質(zhì)干細(xì)胞生物學(xué)性狀的比較.pdf

1、目的：比較人胎盤、臍帶及骨髓源性間充質(zhì)干細(xì)胞（MSCs）的生物學(xué)性狀。
　　方法：采用組織塊貼壁培養(yǎng)法分離培養(yǎng)人胎盤、臍帶源性基質(zhì)細(xì)胞（SCs），采用密度梯度離心法分離培養(yǎng)人骨髓源性SC。采用流式細(xì)胞儀檢測CD29、CD34、CD44、CD133、HLA-DR、vWF的表達(dá)及細(xì)胞周期。應(yīng)用MTT法檢測并比較三種SCs的增殖情況。應(yīng)用免疫熒光技術(shù)檢測并比較MRP1、ABCG2、P75NTR及Nestin在三種SCs的表達(dá)情況；在體外

2、誘導(dǎo)三種SCs向成骨細(xì)胞、脂肪細(xì)胞、神經(jīng)細(xì)胞方向分化，并通過特異性染色鑒定并比較其分化能力。
　　結(jié)果：采用組織塊貼壁法能成功獲得貼壁生長的成纖維樣人胎盤、臍帶源性SCs，采用密度梯度離心法能成功獲得貼壁生長的骨髓源性SCs；流式細(xì)胞術(shù)分析結(jié)果示，人胎盤、臍帶及骨髓源性SCs高表達(dá)CD29、CD44，陰性表達(dá)CD34、CD133、HLA-DR及vWF，細(xì)胞周期結(jié)果示，三種SCs大部分均處于G0/G1期，僅少數(shù)處于分裂期，但臍帶源性

3、SCs處于G0/G1期細(xì)胞最多，而處于S期細(xì)胞最少，處于G2M期細(xì)胞介于胎盤及骨髓源性SCs之間；免疫熒光示MRP1、ABCG2、P75NTR及Nestin在三種SCs中表達(dá)情況相似，即均為陽性表達(dá)，且熒光定位在細(xì)胞的胞漿；MTT檢測結(jié)果顯示，胎盤與臍帶源性SCs增殖較快，兩者增殖速率無差異。三種SCs經(jīng)向脂肪細(xì)胞誘導(dǎo)后油紅O染色陽性，但臍帶源性SCs分化為脂肪細(xì)胞的數(shù)量多，著色深；向成骨細(xì)胞誘導(dǎo)后茜素紅染色為陽性，向神經(jīng)細(xì)胞誘導(dǎo)后，N