amorfrutin A對(duì)NF-κB和STAT3雙重信號(hào)通路作用機(jī)制研究.pdf

1、NF-κB和STAT3是聯(lián)系炎癥和癌癥的兩個(gè)主要轉(zhuǎn)錄因子，調(diào)控許多生理病理過(guò)程，如炎癥、免疫、腫瘤發(fā)生發(fā)展、增殖、凋亡、周期、侵襲和血管生成。在靜息的細(xì)胞中的NF-κB和STAT3主要存在于細(xì)胞質(zhì)中，當(dāng)受到適當(dāng)?shù)耐饨绱碳と鏣NF-α、IL-6、LPS和EGF等，NF-κB和STAT3就會(huì)被激活，活化后的NF-κB和STAT3進(jìn)入細(xì)胞核與DNA結(jié)合介導(dǎo)下游基因的表達(dá)。NF-κB和STAT3調(diào)控的靶基因具有高度的重疊性。amorfrutin

2、 A是從豆科灌木紫穗槐的果實(shí)中提取出的天然小分子化合物，已報(bào)道結(jié)合核受體 PPARγ能改善胰島素的耐藥性、及其他的代謝和炎癥參數(shù)，而不會(huì)引起脂肪積累和其他副作用如肝毒性。雖然amorfrutin A有良好的抗糖尿病作用，然而對(duì)于 NF-κB和 STAT3介導(dǎo)的抗炎抗腫瘤作用機(jī)制尚不明確。
　　本文對(duì)amorfrutin A在NF-κB和STAT3作用機(jī)制及其靶基因方面進(jìn)行了研究。結(jié)果發(fā)現(xiàn)：amorfrutin A抑制NF-κB的活

3、化是通過(guò)抑制TNF-α誘導(dǎo)的IκBα的磷酸化及降解，從而抑制p65的核易位及NF-κB結(jié)合DNA的活性等途徑實(shí)現(xiàn)的。同時(shí)也發(fā)現(xiàn)amorfrutin A是STAT3的一個(gè)抑制劑，amorfrutin A抑制TNF-α誘導(dǎo)的p-STAT3(Tyr705和 Ser727)和 STAT3的核易位及 STAT3的分子伴侶HSP90α/β。進(jìn)一步的研究發(fā)現(xiàn) amorfrutin A抑制 STAT3的活化與其抑制JAK2/STAT3和ERK這兩個(gè)信號(hào)

4、通路相關(guān)。接著我們又檢測(cè)了amorfrutin A對(duì)NF-κB和STAT3下游靶基因的影響，結(jié)果表明amorfrutin A劑量型的下調(diào)TNF-α誘導(dǎo)的抗凋亡蛋白(Bcl2、Bcl-xL、c-IAP1、c-IAP2、survivin、XIAP、FLIP)、增殖相關(guān)蛋白(COX-2)、入侵和遷移相關(guān)蛋白(MMP-9、ICAM-1、vimentin)、血管生成蛋白(VEGF)的表達(dá)；并抑制主要的炎性細(xì)胞因子TNF-α、IL-6、IL-8和M

5、CP-1的mRNA表達(dá)。細(xì)胞集落形成實(shí)驗(yàn)和MTT都進(jìn)一步證明了amorfrutin A能夠抑制增殖。而且amorfrutin A能夠促進(jìn)TNF-α誘導(dǎo)的凋亡，并提高TNF-α誘導(dǎo)的caspase-3和PARP的蛋白水解過(guò)程。此外amorfrutin A劑量型地逆轉(zhuǎn)TNF-α誘導(dǎo)的G1/S期轉(zhuǎn)變，導(dǎo)致細(xì)胞停滯在G1期。同時(shí)抑制TNF-α誘導(dǎo)細(xì)胞周期進(jìn)程正調(diào)控蛋白cyclin D1，c-Myc，Skp2的表達(dá),并且上調(diào)細(xì)胞周期進(jìn)程負(fù)調(diào)控蛋白