電針對(duì)大鼠急性脊髓損傷神經(jīng)細(xì)胞NR1-NR2A受體的調(diào)控作用.pdf

1、目的:觀(guān)察大鼠脊髓損傷(SCI)急性期電針(EA)干預(yù)后損傷組織細(xì)胞形態(tài)及N-甲基-D-天門(mén)冬氨酸受體(NMDA Receptor)亞型NR1、NR2A的mRNA和蛋白表達(dá)的變化，探討電針督脈治療急性脊髓損傷的可能分子機(jī)制。
　　方法:SD雄性大鼠96只隨機(jī)分為4組:假模組（The sham group）、模型組(Thecontrol group)、電針組(The EA group)、藥物組(The drug group)，每組2

2、4只。假模組采用椎板切除術(shù)，模型組、電針組和藥物組采用改良Allen's的撞擊法，通過(guò)MASCIS Impactor精確撞擊制作大鼠脊髓不完全損傷模型（T10打擊，25 cm×10 g）。模型組和假模組不進(jìn)行任何治療，電針組于造模成功后的0.5 h、12h、24 h進(jìn)行電針治療，取大椎穴(Dazhui，DU14)、命門(mén)穴(Mingmen，DU4)，采用韓氏治療儀(2 Hz，0.6-0.8 mA)進(jìn)行電針治療，每次30 min;藥物組于造

3、模成功后0.5h、12h、24 h進(jìn)行藥物治療，使用甲基強(qiáng)的松龍(MP)尾靜脈注射治療(30 mg/kg)。術(shù)后48 h處死動(dòng)物并取材，通過(guò)HE染色法觀(guān)察損傷區(qū)脊髓組織切片細(xì)胞形態(tài)，免疫熒光法和Western Blot法測(cè)定損傷區(qū)脊髓組織中NR1、NR2A蛋白表達(dá)，qRT-PCR法測(cè)定受損的脊髓組織中NR1、NR2A mRNA表達(dá)。
　　結(jié)果:1.模型組脊髓完整結(jié)構(gòu)消失，神經(jīng)元個(gè)數(shù)減少，胞體正常形態(tài)被破壞，軸突及樹(shù)突消失，神經(jīng)元核

4、固縮及凋亡小體形成。兩治療組的壞死程度稍輕，可見(jiàn)少量神經(jīng)元存活。
　　2.模型組NR1、NR2A蛋白及mRNA表達(dá)均高于假模組，差異有非常顯著意義（均P＜0.001）。
　　3.電針組及藥物組NR1、NR2A蛋白及mRNA表達(dá)均非常顯著低于模型組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01或P＜0.001)。
　　4.藥物組NR1 mRNA表達(dá)低于電針組，差異有非常顯著意義(P＜0.01)，兩組間NR2A mRNA、NR1蛋白和N