肌肉肌醇、D-手性肌醇及二者合用對HepG2胰島素抵抗細(xì)胞葡萄糖消耗量的改善作用.pdf

1、目的：通過建立HepG2胰島素抵抗模型（Hep G2-IR），比較肌肉肌醇（myo-inositol,MI）、D-手性肌醇（D-chirol-inositol,DCI）及二者合用對HepG2-IR細(xì)胞葡萄糖消耗量的影響，并探討其作用的可能機(jī)制。
　　方法：
　　1.CCK-8法檢測不同濃度（0、25、35、45、55、65mmol/L）的葡萄糖對HepG2細(xì)胞增殖活性的影響，不同濃度（0、0.25、0.5、1、2、4、8、1

2、6、32mmo l/L）的MI、DCI及二者合用分別對Hep G2細(xì)胞增殖活性的影響，以確定其在實(shí)驗(yàn)中的作用劑量范圍。
　　2.濃度為55mmol/L的葡萄糖持續(xù)作用 HepG2細(xì)胞24h后，1nmol/L胰島素刺激誘導(dǎo)HepG2細(xì)胞15～25min，建立胰島素抵抗細(xì)胞模型；通過葡萄糖氧化酶法（GOD-POD法）檢測對照組與模型組葡萄糖消耗量，以鑒定模型是否成立。
　　3.不同濃度（0.125、0.25、0.5mmol/L）

3、的MI、DCI及二者合用分別作用HepG2-IR細(xì)胞，GOD-POD法檢測它們對葡萄糖消耗量的影響。Western-blot法檢測MI、DCI及二者合用對HepG2-IR細(xì)胞PI3K、pAkt、Akt蛋白表達(dá)的影響。
　　結(jié)果：
　　1.與空白對照組相比，葡萄糖在35～55mmo l/L濃度時(shí)，對HepG2細(xì)胞增殖活性無影響，而葡萄糖在濃度為65mmo l/L時(shí)，對HepG2細(xì)胞增殖活性有顯著的抑制作用（P<0.05）；0～

4、0.5mmol/L濃度的MI、DCI對HepG2細(xì)胞增殖活性無影響，而1～32mmol/L濃度的MI、DCI對HepG2細(xì)胞增殖活性有顯著的抑制作用（P<0.01），且隨MI、DCI濃度的增加，細(xì)胞增殖活性有逐漸降低的趨勢；0～1mmol/L濃度的MI與DCI合用對HepG2細(xì)胞增殖活性無影響，而2～32mmol/L濃度的MI與DCI合用對Hep G2細(xì)胞增殖活性有顯著的抑制作用（P<0.01），且隨MI與DCI合用濃度的增加，細(xì)胞增殖

5、活性有逐漸降低的趨勢。
　　2.GOD-POD法檢測結(jié)果表明，與正常對照組相比，濃度為55mmol/L的葡萄糖持續(xù)作用HepG2細(xì)胞24h，且1nmol/L胰島素刺激15-25min后，被誘導(dǎo)的HepG2細(xì)胞葡萄糖消耗量顯著降低（P<0.01），表明成功建立了HepG2-IR細(xì)胞模型。
　　3.GOD-POD法檢測顯示，與模型對照組相比，MI、DCI及二者合用組都可增加HepG2-IR細(xì)胞葡萄糖消耗量（P<0.05），且每個(gè)

6、組隨著干預(yù)濃度增加，葡萄糖消耗量有逐漸上升的趨勢，在相同濃度下，合用組葡萄糖消耗量增加最顯著（P<0.05）。
　　4.Western-blot分析顯示，與模型對照組相比，MI、DCI及二者合用組可增加HepG2-IR細(xì)胞PI3K蛋白表達(dá)及pAkt/Akt蛋白表達(dá)水平的比值，且每個(gè)組隨著干預(yù)濃度增加，蛋白表達(dá)及蛋白表達(dá)水平的比值有逐漸上升的趨勢，在相同濃度下，合用組提高的PI3K蛋白表達(dá)及pAkt/Akt蛋白表達(dá)水平的比值最顯著（