長裂苦苣菜提取分離及對胰島素抵抗HepG2細(xì)胞糖代謝的影響.pdf

1、長裂苦苣菜(Sonchus brachyotus D C.)，是菊科苦苣菜屬，具有藥食兩用的功效，在我國分布廣泛。藥理作用顯示長裂苦苣菜中的活性成分具有清熱解毒、涼血利濕、清肺止咳、保肝利尿等作用，因此長裂苦苣菜有很好的藥用研究價值。本研究以長裂苦苣菜全草為研究對象，對其提取分離和純化，以及對其在胰島素抵抗 HepG2細(xì)胞體外糖代謝的影響方面進(jìn)行了比較系統(tǒng)的研究。其研究方法及結(jié)論如下分述：
　　1、長裂苦苣菜化學(xué)成分的提取分離與純

2、化
　　本研究用閃式提取器，70％乙醇提取長裂苦苣菜3次，提取液濃縮，再分別用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取以得到各萃取物。萃取物采用硅膠柱層析（CC）、制備薄層層析（PTLC）、葡聚糖凝膠柱層析（Sephadex LH-20）、AKTA（快速工藝開發(fā)系統(tǒng)）和重結(jié)晶等方法進(jìn)行分離純化。從長裂苦苣菜全草中分離得到15個化合物，經(jīng)理化常數(shù)測定、波譜解析（1H-NMR、13C-NMR）確定其中的5個化合物。它們分別是棕櫚酸(palmiti

3、c acid)，β-谷甾醇（β-sitosterol），芹菜素（ Apigenin），木犀草素（ Luteolin）和槲皮素（Quercetin）。
　　2、長裂苦苣菜萃取物對胰島素抵抗 HepG2細(xì)胞體外糖代謝的影響
　　本研究采用高濃度的胰島素，以誘導(dǎo)HepG2細(xì)胞，使其出現(xiàn)葡萄糖代謝異常，并從胰島素的作用濃度以及作用時間方面，進(jìn)行探索并建立胰島素抵抗細(xì)胞模型（HepG2/IR）的最佳條件；分別建立空白組、正常細(xì)胞組、胰

4、島素抵抗模型組、二甲雙胍陽性對照組以及石油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取部位組，利用葡萄糖測定試劑盒檢測各組葡萄糖的消耗量，并采用 MTT法對各組細(xì)胞活性進(jìn)行評價。結(jié)果表明，10-8mol/L濃度的胰島素誘導(dǎo)處理 HepG2細(xì)胞12h是產(chǎn)生胰島素抵抗的最佳條件；與 HepG2/IR模型組相比，各萃取部位均可以改善 HepG2/IR細(xì)胞的葡萄糖消耗情況，其中以乙酸乙酯部位效果最佳。故長裂苦苣菜提取物有一定的改善胰島素抵抗的作用。
　　本論