HELQ激活CHK1-RAD51信號(hào)通路抑制人骨肉瘤細(xì)胞惡性表型.pdf

1、目的：
　　探討HELQ對(duì)人骨肉瘤細(xì)胞DNA損傷修復(fù)及惡性表型的影響及分子機(jī)制。方法：
　　構(gòu)建靶向HELQ的慢病毒載體（Lv-shHELQ、Lv-HELQ）和陰性對(duì)照載體，分別轉(zhuǎn)染人骨肉瘤細(xì)胞系143B和U2-OS細(xì)胞，陰性慢病毒轉(zhuǎn)染為陰性對(duì)照。轉(zhuǎn)染48h后，分別運(yùn)用Transwell實(shí)驗(yàn)、劃痕實(shí)驗(yàn)、CCK8實(shí)驗(yàn)和彗星實(shí)驗(yàn)檢測(cè)人骨肉瘤細(xì)胞的侵襲、遷移、增殖能力以及細(xì)胞中DNA損傷水平。運(yùn)用熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)檢測(cè)細(xì)胞中HEL

2、QmRNA表達(dá)水平，WesternBlot實(shí)驗(yàn)檢測(cè)細(xì)胞中HELQ、CHK1以及RAD51蛋白表達(dá)水平。
　　結(jié)果：
　　骨肉瘤細(xì)胞系143B和U2-OS細(xì)胞中HELQmRNA表達(dá)水平明顯低于成骨細(xì)胞，而HELQ蛋白表達(dá)水平卻明顯高于成骨細(xì)胞。與陰性對(duì)照組相比，下調(diào)HELQ的表達(dá)水平可以顯著增強(qiáng)骨肉瘤細(xì)胞的侵襲、遷移以及增殖能力，而上調(diào)HELQ的表達(dá)水平可以顯著抑制骨肉瘤細(xì)胞的侵襲、遷移以及增殖能力；上調(diào)HELQ的骨肉瘤細(xì)胞中