七氟烷預(yù)處理對(duì)心臟瓣膜置換術(shù)患者外周血單個(gè)核細(xì)胞內(nèi)Nrf2蛋白和心肌抗氧化應(yīng)激的影響.pdf

1、目的：心肺轉(zhuǎn)流術(shù)(CPB)可引起機(jī)體器官缺血再灌注損傷，七氟烷是一種常用的吸入性麻醉藥，具有心肌保護(hù)作用，而作用機(jī)制仍未完全闡明，氧化應(yīng)激是產(chǎn)生缺血再灌注損傷的作用機(jī)制之一，核因子相關(guān)因子2(nuclear factor erythroid2-related factor2。Nrf2)處于抗氧化應(yīng)激的關(guān)鍵地位，本文通過檢測單個(gè)核細(xì)胞內(nèi)Nrf2的表達(dá)、血清中心肌損傷指標(biāo)和觀察相關(guān)臨床指標(biāo)，評(píng)價(jià)七氟烷預(yù)處理對(duì)CPB下行心臟瓣膜置換術(shù)患者外周

2、血單個(gè)核細(xì)胞內(nèi)Nrf2蛋白表達(dá)和心肌抗氧化應(yīng)激的影響，為探討七氟烷對(duì)心肌保護(hù)作用的機(jī)制提供一定的參考依據(jù)。
　　方法：選取擇期CPB下心臟瓣膜置換術(shù)患者40例，隨機(jī)分為2組(n=20)。七氟烷預(yù)處理組(S組)：切皮至主動(dòng)脈阻斷前，吸入呼氣末濃度為1％七氟烷20min，隨后予以10min洗脫期，如此重復(fù)2次；對(duì)照組(C組)：不給予吸入麻醉藥。常規(guī)術(shù)前準(zhǔn)備，患者入室后開放外周靜脈，監(jiān)測五導(dǎo)聯(lián)心電圖(ECG)、心率(HR)、指測脈搏氧飽

3、和度(SpO2)、有創(chuàng)血壓、鼻咽直腸溫度和Narcotrend麻醉深度指數(shù)(Narcotrend Index。NTI)。經(jīng)外周靜脈給予全身麻醉誘導(dǎo)藥物，劑量：依托咪酯0.2～0.4 mg/kg、咪達(dá)唑侖0.08～0.15 mg/kg、舒芬太尼0.5～0.8μg/kg、羅庫溴銨0.6～1 mg/kg，麻醉誘導(dǎo)維持循環(huán)平穩(wěn)。氣管插管后行機(jī)械控制通氣，呼吸機(jī)參數(shù)：氧流量2～3L/min，潮氣量(VT)6～10 mL/kg，呼吸頻率（RR)12

4、～15次/min，吸呼比(I:E)1:1.5～2，維持呼氣末二氧化碳分壓(End-tidal carbon dioxide partial pressure。PETCO2)35～45 mmHg。經(jīng)右頸內(nèi)靜脈穿刺留置三腔中心靜脈導(dǎo)管，監(jiān)測中心靜脈壓(CVP)。經(jīng)口置入食管超聲多普勒探頭(WaKie TO,Atys Medical,法國)監(jiān)測左心功能。采用德國Jostra HL20型體外循環(huán)機(jī)和Maquet膜式氧合器進(jìn)行CPB，非搏動(dòng)性灌注

5、方式，CPB期間維持平均動(dòng)脈壓(MAP)50～80mmHg。術(shù)后帶管控制呼吸，常規(guī)監(jiān)護(hù)下送入心臟外科加強(qiáng)監(jiān)護(hù)病房(ICU)，待呼吸循環(huán)穩(wěn)定、符合拔管條件時(shí)拔除氣管導(dǎo)管。分別于麻醉誘導(dǎo)前(T1)、主動(dòng)脈開放后2h(T2)、24h(T3)、48h(T4)時(shí)點(diǎn)采集兩組患者橈動(dòng)脈血樣，采用 ELISA試劑盒檢測血清中 cTnI、丙二醛(MDA)濃度和超氧化物歧化酶(SOD)活性。于T1和T3時(shí)點(diǎn)抽取橈動(dòng)脈血樣，立即用淋巴細(xì)胞分離液分離外周血單個(gè)

6、核細(xì)胞(peripheral blood mononuclear cell。PBMC)后提取核蛋白，放入-80℃冰箱，待標(biāo)本收集后，BCA法測蛋白濃度，按常規(guī)Western blot法完成操作（Nrf2抗體購于Bioworld公司，美國），用Image-Pro Plus6.0軟件進(jìn)行蛋白灰度分析。臨床指標(biāo)：記錄切皮前、停CPB后30min和手術(shù)結(jié)束時(shí)HR、MAP、每搏量(stroke volume。SV)和心臟指數(shù)(cardiac in

7、dex。CI)；記錄主動(dòng)脈阻斷時(shí)間、CPB時(shí)間、術(shù)中失血量、心臟自動(dòng)復(fù)跳率、機(jī)械通氣時(shí)間、ICU停留時(shí)間、實(shí)際住院天數(shù)、血管活性藥物使用量和術(shù)后一周心臟左室射血分?jǐn)?shù)(left ventricular ejection fraction。LVEF)。
　　結(jié)果：兩組患者一般資料和術(shù)中各指標(biāo)差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。與麻醉前T1時(shí)比較，T2、T3和T4時(shí)兩組患者血清中cTnI濃度均明顯升高(P<0.05)，但各時(shí)點(diǎn)S組均明顯

8、低于C組，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。與T1時(shí)比較，兩組T2～4時(shí)血清中MDA濃度升高，SOD活性下降(P<0.05)；與C組比較，S組T2～4時(shí)MDA濃度降低，SOD活性升高(P<0.05)。與麻醉前比較，兩組主動(dòng)脈開放后24h外周血單個(gè)核細(xì)胞胞核內(nèi)Nrf2蛋白表達(dá)升高(P<0.05)；與C組比較，S組主動(dòng)脈開放后24h胞核內(nèi)Nrf2蛋白表達(dá)升高(P<0.05)。切皮前兩組患者HR、MAP、SV和CI比較差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P

9、>0.05)；停CPB后30min和手術(shù)結(jié)束時(shí)，S組中MAP、SV和CI均高于C組(P<0.05)，S組HR低于C組，但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。兩組中LVEF值術(shù)后均較術(shù)前降低，但術(shù)后LVEF值S組較C組高(P<0.05)。與C組比較，S組中多巴胺用量和多巴酚丁胺用量均減少(P<0.05)；ICU停留時(shí)間、機(jī)械通氣時(shí)間和實(shí)際住院天數(shù)均縮短(P<0.05)；心臟自動(dòng)復(fù)跳率和腎上腺素使用例數(shù)比較差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　結(jié)論：七氟烷預(yù)處理可