急性心肌梗死患者外周血單個核細胞NADPH氧化酶2的表達和活性與氧化應(yīng)激的關(guān)系研究.pdf

1、背景活性氧的增加與心血管疾病密切相關(guān)，有研究證實活性氧參與了動脈粥樣硬化的病理過程。而產(chǎn)生活性氧的主要酶體之一是尼可酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶(NAPDH氧化酶，NOX)。NOX2主要分布在中性粒細胞、單核細胞和巨噬細胞中。NOX2激活能夠產(chǎn)生活性氧，進一步引起LDL和蛋白的氧化。目前有關(guān)急性心肌梗死患者單個核細胞NOX2的表達和活性與氧化應(yīng)激的關(guān)系的研究尚少，本研究就此問題作初步的探討。 目的：探討急性心肌梗死患者外周血單個

2、核細胞NOX2的表達和活性與氧化應(yīng)激的關(guān)系，為從抗氧化的角度防治心肌梗死和動脈粥樣硬化提供理論依據(jù)。 方法：選擇35例急性心肌梗死患者為AMI組，32例健康人為對照組。兩組均空腹抽血查生化指標及Hs-CRP，通過檢測血清中抗氧化酶類SOD的活性、脂類氧化應(yīng)激標記物MDA、蛋白氧化應(yīng)激標記物蛋白羰基化，對AMI組和正常對照組機體氧化應(yīng)激狀態(tài)進行全面分析。在此基礎(chǔ)上，進一步用Real-time PCR及Western blot比較A

3、MI組和正常對照組單個核細胞中NOX2及其亞組分的表達，并應(yīng)用間接免疫熒光法對NOX2亞組分p47phox在細胞中的定位進行檢測，比較AMI組和正常對照組NADPH氧化酶的活性。最后用SPSS軟件對所檢測的臨床指標、氧化應(yīng)激指標和NOX2及其亞組分的表達進行分析。 結(jié)果： (1)AMI組MDA為8.14±2.13(nmol/ml)，明顯高于對照組4.75±2.56(nmol/ml)(p<0.001)。AMI組血清蛋白羰基化水平明

4、顯高于正常組，為正常組的1.64倍(P<0.05)。AMI組SOD活力水平為89.14±5.93(U/ml)，明顯低于正常組100.00±8.87(U/ml)，兩組間有顯著性差異(P<0.01)。AMI組和對照組的Hs-CRP水平分別為8.74±4.62(mg/dl)及0.22±0.56(mg/dl)(p<0.001)。(2)Real-timePCR的檢測結(jié)果表明，AMI組和對照組的NOX2相對含量分別為1.62±0.76和0.96±0

5、.58。與正常對照相比，AMI組單個核細胞中NOX2表達明顯增加(P<0.001)，而其它亞組分p47phox，p22phox的表達無明顯差異。Western blot的結(jié)果與以上結(jié)果相一致。(3)在AMI組中，P 47phox高度活化，活化率AMI組為59.59％，對照組為18.7％，存在顯著差異(P<0.01)。(4)AMI組中FBS、TC、HDL、Hs-CRP和UA與對照組有顯著性差異。相關(guān)性分析表明，NOX2和MDA的升高分別與

6、Hs-CRP正相關(guān)。(5)AMI合并糖尿病與AMI無糖尿病患者NOX2、MDA、SOD和Hs-CRP的水平無明顯差異。 結(jié)論： (1) AMI組患者血清中MDA和蛋白羰基化比對照組有明顯的升高，而SOD水平下降，說明AMI時機體處于氧化應(yīng)激狀態(tài)，提示這種氧化應(yīng)激可能與動脈粥樣硬化斑塊不穩(wěn)定有關(guān)。 (2) NOX2在AMI組患者血單個核細胞的表達比對照組明顯增高，而p47phox和p22phox在兩組的表達沒有差異