血竭蜈蚣油對大鼠慢性鼓膜穿孔愈合的影響.pdf

1、目的：本實驗利用大鼠慢性鼓膜穿孔模型，觀察血竭蜈蚣油對大鼠慢性鼓膜穿孔愈合的影響，探討血竭蜈蚣油對大鼠慢性鼓膜穿孔修復(fù)的可行性，為藥物的臨床應(yīng)用提供理論基礎(chǔ)及實驗依據(jù)。
　　方法：1.建立SD大鼠(Sprague Dawley大鼠)慢性鼓膜穿孔模型：SD大鼠35只，其中5只為正常對照組。余30只大鼠水合氯醛腹腔注射麻醉（100mg/kg），消毒外耳道，在手術(shù)顯微鏡下，用灼熱尖針灼燒大鼠雙側(cè)鼓膜緊張部，制成約占鼓膜面積80％的穿孔。

2、每周在手術(shù)顯微鏡下觀察鼓膜穿孔愈合情況，對于穿孔面積小于50%的再次擴(kuò)大到80%，計時自最后一次手術(shù)后開始。為預(yù)防鼓膜感染，每次術(shù)后肌注氨芐青霉素（150mg/kg）、0.25%氯霉素眼藥水滴耳，1次/天，連續(xù)1周。術(shù)后第8周在手術(shù)顯微鏡下選取鼓膜緊張部穿孔超過50%面積且穩(wěn)定的慢性穿孔；2.實驗處理：規(guī)定左耳為血竭蜈蚣油組，右耳為模型組。在手術(shù)顯微鏡下，使用尖針祛除鼓膜穿孔邊緣陳舊性組織，搔刮穿孔內(nèi)側(cè)面，制造新鮮創(chuàng)面，然后在鼓膜上放置

3、2平方毫米棉片，血竭蜈蚣油組滴1g/ml血竭蜈蚣油溶液0.1ml，每周更換藥棉3次，滴1g/ml血竭蜈蚣油1次/天；模型組滴等容積0.1ml的注射用甘油。術(shù)后肌肉注射氨芐青霉素（150mg/kg）1次/天，連續(xù)1周。每次更換藥棉時手術(shù)顯微鏡觀察鼓膜愈合情況，鼓膜穿孔快愈合時每天觀察1次，記錄鼓膜穿孔愈合時間，用耳內(nèi)鏡拍照。2個月后過量麻藥處死大鼠，解剖取出顳骨，浸入10%甲醛中固定24h，取下聽泡，強(qiáng)酸脫鈣，取鼓膜及鼓膜附著處組織，切片

4、，常規(guī)HE染色，光鏡檢查。正常對照組、模型組及血竭蜈蚣油組三組隨機(jī)各取8張片，放大400倍用顯微鏡目鏡度量格測定觀察鼓膜各層厚度。兩組鼓膜穿孔愈合率差異比較采用四格表資料的卡方檢驗完成，愈合時間比較采用T檢驗，三組鼓膜總厚度運用單因素方差分析后行兩兩比較，統(tǒng)計分析過程均由醫(yī)學(xué)統(tǒng)計軟件SPSS19.0完成。
　　結(jié)果:1.手術(shù)后第8周，有46耳（左耳24只，右耳22只）慢性穿孔穩(wěn)定且穿孔面積超過緊張部面積的50%，SD大鼠鼓膜慢性穿

5、孔模型成功率76.7%（46/60）。造模過程中共有14耳被剔除，1只大鼠因麻醉意外死亡，7耳鼓膜感染，5耳穿孔完全或未完全愈合；2.模型組愈合率22.7%（5/22），血竭蜈蚣油組穿孔愈合率83.3%（20/24），兩組鼓膜愈合率有顯著性差異(P<0.05)，愈合時間血竭蜈蚣油組明顯縮短（P<0.05）；3.血竭蜈蚣油治療后愈合的鼓膜厚度及組織結(jié)構(gòu)與正常鼓膜相近（P>0.05），而正常對照組和血竭蜈蚣油組愈合的鼓膜比模型組都要厚（P<