吩噻嗪類光敏劑介導(dǎo)的光動力抗菌療法對白色念珠菌的殺傷作用研究.pdf

1、目的:
　　通過比較不同吩噻嗪類光敏劑介導(dǎo)下的光動力抗菌療法(APDT)對白色念珠菌的體外殺傷作用，為臨床選擇高效適宜的光敏劑提供理論基礎(chǔ)。探討APDT對艾滋病(AIDS)患者合并口腔白色念珠菌感染的真菌治療效果
　　方法:
　　第一部分為體外實(shí)驗(yàn)，選取白色念珠菌標(biāo)準(zhǔn)株DAY286為實(shí)驗(yàn)對象，將其制備成濃度為107個/mL的細(xì)胞懸液。實(shí)驗(yàn)分為四組:對照組、光動力組(APDT組)、光照組和光敏劑組。
　　(1)對照

2、組:既不加入光敏劑，也不予以光照射。
　　(2)APDT組:將白色念珠菌細(xì)胞懸液分別與不同濃度的吩噻嗪類光敏劑亞甲藍(lán)(MB)、甲苯胺藍(lán)(TBO)、新亞甲藍(lán)(NMB)及二甲基藍(lán)(DMMB)避光混合孵育30min，再予以同等能量不同波長的光源照射。
　　(3)光照組:不加入光敏劑，僅予以同APDT組相同能量和波長的光源照射。
　　(4)光敏劑組:僅加入濃度相同的光敏劑MB、TBO、NMB及DMMB，不予以任何光照。用菌落形

3、成單位(CFU)測定各組處理后白色念珠菌的存活菌落數(shù)。
　　第二部分為臨床研究，根據(jù)體外實(shí)驗(yàn)結(jié)果選取對白色念珠菌殺傷作用最強(qiáng)的DMMB為光敏劑，選取31例AIDS合并口腔白色念珠菌感染者為受試對象。治療前囑受試對象用0.1mmol/L的磷酸鹽緩沖液(PBS)含漱10s，將濃度1.2mmol/L DMMB均勻涂擦到受試者口腔黏膜病變處避光孵育3min，然后用波長635nm的激光光源照射口腔30mim，連續(xù)治療3天。直接鏡檢法測定治療

4、前后白色念珠菌細(xì)胞數(shù)，用每次治療后白色念珠菌數(shù)與治療前白色念珠菌數(shù)的比計(jì)算白色念珠菌的生存率。
　　結(jié)果:
　　(1)光敏劑濃度15μmol/L時，不同吩噻嗪類光敏劑（MB、TBO、 NMB、DMMB）介導(dǎo)的APDT作用下，白色念珠菌菌落數(shù)生存率分別為78.38％、68.47％、62.37％、0.0001％，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。在濃度為0.1～15μ mol/L時，DMMB濃度越高，APDT對白色念珠菌的的殺傷

5、作用越強(qiáng)(P＜0.05)。在濃度為5～100μmol/L時，TBO和MB的介導(dǎo)的APDT對白色念珠菌菌落數(shù)的殺傷作用與光敏劑濃度正相關(guān)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。光敏劑組、光照組與對照組比較差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。
　　(2)AIDS合并的口腔白色念珠菌病患者予以光敏劑DMMB介導(dǎo)的APDT治療1次后的白色念珠菌數(shù)與治療前相比，生存率為49.34％;治療第2次后的白色念珠菌的生存率為35.58％;第3次后白色念