阿霉素誘導(dǎo)多發(fā)性骨髓瘤細(xì)胞自噬和氧化應(yīng)激變化及相互作用.pdf

1、目的:探討阿霉素（doxorubicin，DOX）誘導(dǎo)對多發(fā)性骨髓瘤細(xì)胞系RPMI-8226細(xì)胞自噬和活性氧簇（reactive oxidative species，ROS）生成的影響，及其相互作用關(guān)系。
　　方法:不同濃度阿霉素誘導(dǎo)RPMI-8226細(xì)胞24 h,采用Western blot技術(shù)檢測細(xì)胞內(nèi)beclin1、LC3等自噬相關(guān)蛋白的表達(dá)水平。采用DCFH-DA熒光染色法檢測RPMI-8226細(xì)胞內(nèi)ROS的水平，熒光顯微

2、鏡采集圖像。采用氧自由基清除劑N-乙酰半胱氨酸（ N-acetyl-L-cysteine，NAC）及Tempol處理RPMI-8226細(xì)胞后，通過Western blot技術(shù)檢測阿霉素誘導(dǎo)下細(xì)胞內(nèi)beclin1、LC3等蛋白的表達(dá)水平。采用自噬抑制劑3-甲基腺嘌呤（3-methyladenine，3-MA)處理PRMI-8226細(xì)胞后，檢測阿霉素誘導(dǎo)下細(xì)胞內(nèi)ROS和凋亡的表達(dá)水平。
　　結(jié)果：RPMI-8226細(xì)胞內(nèi)beclin1

3、、LC3B/LC3A表達(dá)水平呈阿霉素劑量依賴性增加，當(dāng)阿霉素誘導(dǎo)濃度達(dá)2 mg/L時(shí)，與對照組比較顯著增加（P<0.05）。采用阿霉素2 mg/L誘導(dǎo)RPMI-8226細(xì)胞，通過熒光顯微鏡觀察，ROS水平較對照組明顯增加。氧自由基清除劑NAC和Tempol處理RPMI-8226細(xì)胞后，beclin1和LC3II/I的表達(dá)水平較阿霉素處理組下降。采用自噬抑制劑3-MA處理細(xì)胞后，RPMI-8226細(xì)胞內(nèi)ROS和凋亡的水平較阿霉素處理組及對