仙人掌、桑葉及藍(lán)莓化學(xué)成分提取分離和小分子藥物與BSA的相互作用研究.pdf

1、目的：采用多種色譜法分離純化仙人掌、桑葉醇提物中的化合物，并對分離所得的化合物進(jìn)行結(jié)構(gòu)鑒定。采用高速逆流色譜技術(shù)結(jié)合葡聚糖凝膠色譜技術(shù)分離藍(lán)莓干果醇提物中的化學(xué)成分，并對分離所得的樣品進(jìn)行純度測定及定性鑒定。采用熒光光譜及紫外光譜法研究在接近人體生理環(huán)境的pH7.4的Tris-HCl緩沖液條件下研究苯佐卡因（BZC）與牛血清白蛋白（BSA）結(jié)合作用的機制。
　　方法：（1）仙人掌、桑葉用乙醇浸提后，用正相硅膠柱層析法、大孔吸附樹脂

2、層析法、葡聚糖凝膠柱色譜法、制備薄層色譜法（制備TLC）、制備高效液相色譜法對粗提物進(jìn)行分離純化。最后，分離得到的化合物經(jīng)LC-MS及NMR鑒定分析。（2）藍(lán)莓干果用1％鹽酸酸化的60%乙醇浸提后，用葡聚糖凝膠色譜法及高速逆流色譜法對醇提取分離純化，分離得到的化合物經(jīng)UPLC測定純度。（3）在接近人體生理環(huán)境的pH7.4的Tris-HCl緩沖液條件下，采用熒光光譜、同步熒光光譜、紫外吸收光譜對BZC與BSA的平衡常數(shù)、結(jié)合位點數(shù)n、結(jié)合

3、距離進(jìn)行測量。
　　結(jié)果：（1）經(jīng)鑒定，仙人掌中5種化合物分別為鄰苯二甲酸二丁酯（dibutyl phthalate）、胡蘿卜苷（adaucosterol）、5-甲氧基呋喃甲醇(5-Methoxy furan methanol)、2-(4羥基-3-甲氧基苯基)-乙基-O-β-D-吡喃葡萄糖苷（2-(4-Hydroxy-3-methoxyphenyl)-ethy-l-O-β-D-gluco-pyranoside）、5-羥甲基糖醛（5

4、-hydroxymethylfurfural）。（2）桑葉中2種化合物分別為羽扇豆醇（Lupeol）、二氫山奈酚（Dihydrokaempfero）。（3）從藍(lán)莓干果中分離得到2個樣品，經(jīng)鑒定純度分別為65.0%和90.0%。（4）苯佐卡因?qū)εＱ灏椎鞍子泻軓姷臒晒忖缱饔?，猝滅機理主要為靜態(tài)猝滅。靜態(tài)淬滅常數(shù)Kq分別為1.52×1012 L/(mol· s)（pH7.4,291 K）和1.39×1012 L/(mol· s)（pH7.

5、4,310 K），結(jié)合位點數(shù)n約為1，結(jié)合距離為2.02 nm。
　　結(jié)論：（1）本研究采用4種色譜技術(shù)從仙人掌中分離得到5種化合物，其中除化合物Ⅱ外，其余均為首次從本植物中分離得到的化合物；本實驗采用2種色譜技術(shù)從桑葉中分離得到2種化合物，其中化合物Ⅱ為首次從本植物中分離得到的化合物。本研究為仙人掌及桑葉化學(xué)成分及其生物活性研究奠定基礎(chǔ)。（2）本研究采用高速逆流色譜法結(jié)合葡聚糖凝膠色譜法對藍(lán)莓果實中的花青素進(jìn)行了分離，為藍(lán)莓中花