桑葉有效部位制備與化學(xué)成分定性研究.pdf

1、近些年來，國內(nèi)外有關(guān)學(xué)者在積極研究天然、保健、安全的藥食兩用植物，而桑葉正屬于此研究范圍。桑葉始載于《神農(nóng)本草經(jīng)》，為桑科植物桑Morus alba L.的干燥葉。本品性寒、味甘苦，具有疏散風(fēng)熱、清肺潤燥、清肝明目的功能，是常用中藥之一。現(xiàn)代研究表明桑葉具有降血糖，降血脂、抗粥樣硬化、抗炎抗衰老，抗病毒等藥理作用。本文以桑葉作為研究對象，提取純化得到了桑葉總酚和總生物堿兩個有效部位。通過查閱相關(guān)文獻，優(yōu)化出從桑葉中提取純化得到總酚和總生

2、物堿的最佳工藝參數(shù)。這對研制出新型中藥治療糖尿病藥物有著重要的應(yīng)用價值?；诖耍龉ぷ魅缦?
　　1，用四種方法對桑葉提取溶劑和提取方式進行了篩選，堿水回流和堿水滲漉提取液中蘆丁含量很低，醇提取液中蘆丁和綠原酸含量大于水提液中兩倍以上。利用正交實驗法篩選出最佳提取工藝，實驗結(jié)果表明，最佳提取條件為:加70％乙醇量12倍與10倍、提取兩次、提取時間2小時。
　　2，對常用的兩種型號陽離子樹脂進行了比較，732型陽離子樹脂DN

3、J轉(zhuǎn)移率較高，但是重復(fù)使用的效果極差，而D001型樹脂重復(fù)使用效果很好;通過單因素實驗篩選出桑葉中總生物堿最佳純化參數(shù):所用陽離子樹脂為D001，最佳樹脂量為1.2BV。陽離子樹脂吸附洗脫最佳參數(shù)為:上樣流速10 mL/min，樹脂溶脹時間9小時，氨水洗脫濃度2％，洗脫體積4BV。陰離子樹脂吸附洗脫最佳參數(shù)為樹脂量2BV。三次實驗結(jié)果表明DNJ含量x±s為（25.8±1.5）％，工藝穩(wěn)定性良好。且DNJ純度較高。
　　3，通過靜態(tài)

4、與動態(tài)吸附從8種大孔樹脂中篩選出AB-8作為桑葉總酚的吸附樹脂通過單因素實驗篩選出桑葉中總酚最佳純化參數(shù):一次大孔樹脂工藝參數(shù):大孔樹脂型號為AB-8，上樣pH2.0，藥液濃度0.25g.mL-1，上樣量0.8BV，0.5％氨水洗脫體積3BV;大孔樹脂二次吸附洗脫最佳參數(shù)為上樣量1.25BV、50％乙醇洗脫體積3BV。三次實驗結(jié)果表明總酚含量x±s為（52±1.5）％，工藝穩(wěn)定性良好，得到桑葉總酚純度較高。
　　4，采用HPLC-

5、ESI-MS對桑葉總酚部位的主要化學(xué)成分進行了定性分析。采用HPLC-ESI-MSn聯(lián)用技術(shù)，通過質(zhì)譜斷裂和紫外吸收光譜等途徑初步鑒定了桑葉總酚部位中的主要的12個化合物:新綠原酸、綠原酸、隱綠原酸、咖啡酰莽草酸（同分異構(gòu)體）、蘆丁、異槲皮苷、槲皮素-3-O-(6”-O-乙?；?-β-D-吡喃葡萄糖、山奈酚-3-O-蕓香糖苷、紫云英苷、山奈酚-3-O-(6”-O-乙?；?-β-D-吡喃葡萄糖苷、槲皮素和山奈酚。
　　5，采用UPL

6、C-ESI-MS對桑葉總生物堿部位的主要化學(xué)成分進行了定性分析。采用UPLC-ESI-MS聯(lián)用技術(shù)，通過質(zhì)譜數(shù)據(jù)和對照品比對等途徑初步鑒定了桑葉生物堿部位中的主要的4個化合物:2-O-β-Glc-DAB、DNJ、蕎麥堿和N-甲基-1-DNJ。
　　6，通過中試放大實驗驗證了實驗室小試工藝的穩(wěn)定性，按照實驗室小試工藝流程和參數(shù)進行放大，中試桑葉用量10Kg，結(jié)果中試實驗所得總酚干浸膏得率總體在14％以上，總酚純度大于50％;總生物堿