薔薇紅景天化學(xué)成分和抗心急缺血有效部位的研究.pdf

1、本研究的目的是：①確定薔薇紅景天抗心肌缺血有效部位及其主要化學(xué)成分組成。②優(yōu)選出有效部位的工業(yè)化生產(chǎn)工藝。③確定有效部位的質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)。 方法：①采用酵母雙雜交系統(tǒng)及小鼠急性心肌梗塞模型為抗心肌缺血活性跟蹤方法，通過溶劑極性梯度萃取的方法分離薔薇紅景天中抗心肌缺血活性部分，并利用硅膠柱色譜、PTLC、C-18柱色譜、制備HPLC等手段確定有效部位中的主要化學(xué)成分。②以有效部位化學(xué)成分為優(yōu)選指標(biāo)，采用單因素實驗與多因素實驗相結(jié)合的

2、方法篩選有效部位提取工藝及純化精制工藝。③經(jīng)過方法學(xué)考察建立了有效部位的質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)。 結(jié)果：①確定正丁醇部分為有效部位所在的極性溶劑層, 藥理活性的初篩表明該層的FractionG、J、K、N、R、V活性最明顯。同時從薔薇紅景天中分離得到了26個單體化合物，通過理化性質(zhì)分析和波譜解析鑒定了其中的17個，這些化合物中7個為新化合物，10個為已知化合物，5個化合物為從該屬植物中首次分離得到。②經(jīng)過提取工藝篩選、堿性醇沉除雜工藝篩選

3、、聚酰胺和大孔樹脂精制工藝的篩選、工藝調(diào)整及中試放大生產(chǎn)最后確定紅景天有效部分提取制備工藝路線為：以水為紅景天藥材的提取溶劑，提取兩次，每次兩小時，第一次加水量為16倍，第二次加水量為12倍，濃縮使藥液密度為1.00g/ml（每毫升藥液相當(dāng)于一克藥材），濃縮液加95％乙醇調(diào)溶液醇濃度為70％，用40％氫氧化鈉溶液調(diào)pH為9.0，置冰箱冷藏24小時，減壓過濾，濃縮使藥液密度為1.00g/ml（每毫升藥液相當(dāng)于一克藥材），上大孔樹脂進(jìn)行精制

4、，大孔樹脂上樣量為每20g大孔樹脂上樣10ml，洗脫速度為2BV/h(每小時2個柱床體積)，先用2倍大孔樹脂體積的水洗脫后棄去，再用4倍60％乙醇溶液洗脫后濃縮干燥得干浸膏。③根據(jù)中國藥典2005版附錄中關(guān)于質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)建立的指導(dǎo)原則，建立了反相高效液相色譜法測定薔薇紅景天抗心肌缺血有效部位中Rosiridin 、Rhodiocyanoside A、紅景天苷和酪醇的含量，經(jīng)方法學(xué)考察該方法符合含量測定有關(guān)規(guī)定。 結(jié)論：①有效部位的確

5、定及紅景天中化學(xué)成分的系統(tǒng)研究作為后續(xù)的工藝研究及質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的建立奠定了基礎(chǔ)。②以有效部位化學(xué)成分為提取指標(biāo)，采用單因素實驗與多因素實驗相結(jié)合的方法篩選有效部位粗提物的水提取工藝，并采用堿性醇沉與大孔樹脂吸附技術(shù)相結(jié)合的純化方法可以使純化產(chǎn)品中指標(biāo)成分的含量達(dá)到有效部位的要求，同時藥效學(xué)實驗表明該有效部位的藥理活性與基礎(chǔ)研究時溶劑萃取法獲得的有效部位的活性無統(tǒng)計學(xué)差別，從而成功實現(xiàn)了有效部位的制備工藝由天然藥物化學(xué)分離方法轉(zhuǎn)變?yōu)榭晒I(yè)化生