木犀草素-SBE-β-CD包合物的制備和生物利用度研究.pdf

1、木犀草素（luteolin）是一種天然的黃酮類化合物，作為拓撲異構(gòu)酶抑制劑，是一種十分具有抗癌前景的中藥活性成分。研究證實木犀草素還具有抗氧化、抗炎、抗菌等方面的作用。然而木犀草素水溶性較差，限制了其臨床應(yīng)用。磺丁基醚-β-環(huán)糊精(s ulfo b utyl ether-β-cyclodextrin，SBE-β-CD)具有毒性小、增溶作用大、包合能力強等優(yōu)點，將木犀草素制成S BE-β-C D包合物，可以增加藥物的溶解度和穩(wěn)定性，提高藥

2、物生物利用度。
　　本課題采用S BE-β-C D對木犀草素進行包合，HP LC法測定包合物中木犀草素的含量，對木犀草素/S BE-β-C D包合物進行了制備工藝優(yōu)化和質(zhì)量評價，并對木犀草素及其 S BE-β-C D包合物進行了藥代動力學(xué)研究。具體研究內(nèi)容主要包括以下兩個部分：
　　第一部分：正交試驗法優(yōu)選木犀草素/S BE-β-C D包合物制備工藝的研究
　　目的：建立木犀草素/S BE-β-C D包合物中木犀草素含

3、量測定的方法，優(yōu)化木犀草素/S BE-β-C D包合物的制備工藝，對木犀草素/SBE-β-CD包合物進行質(zhì)量評價。方法：采用 HPLC法，色譜條件：色譜柱：Agilent ZORBAX SB-C18(4.6×250mm,5μm)；流動相：0.2％H3PO4-甲醇（30:70）；流速：1mL/min；檢測波長：348nm；柱溫：25℃。研磨法制備木犀草素/S BE-β-C D包合物，以包合率和收率擬合的綜合結(jié)果為評價指標(biāo)，采用正交試驗法考

4、察 S BE-β-C D與木犀草素的投料比例、加水量、研磨時間對制備工藝的影響，優(yōu)選制備木犀草素/S BE-β-C D包合物的最佳工藝。采用相溶解度圖法、紅外光譜法、差示掃描量熱法對包合物進行驗證，并測定木犀草素與木犀草素/S BE-β-C D包合物的溶解度與油水分配系數(shù)。結(jié)果：木犀草素在6.69~20.08μg/mL濃度范圍內(nèi)線性關(guān)系良好，回歸方程為Y=23794 X﹣17234（r=0.999），平均加樣回收率為101.51%，RS

5、D為1.62%，專屬性、精密度、重復(fù)性、穩(wěn)定性各項指標(biāo)均符合方法學(xué)考察要求。包合工藝的最佳條件為：S BE-β-C D與木犀草素投料比例2:1，加水量100μL，研磨時間70m in。形成的包合物主客分子比為1∶1。木犀草素與S BE-β-C D形成包合物后，溶解度增大62.90倍，油水分配系數(shù)由0.7656增大為1.0084。結(jié)論：HP LC法測定木犀草素/S BE-β-C D包合物中木犀草素的含量符合方法學(xué)考察要求，經(jīng)正交試驗法優(yōu)選

6、制得的木犀草素/SBE-β-CD包合物具較好的包合率與收率，SBE-β-CD的包合作用提高了木犀草素的溶解度與油水分配系數(shù)。
　　第二部分:木犀草素及其S BE-β-C D包合物的藥代動力學(xué)研究
　　目的：建立木犀草素在大鼠血漿中的含量測定方法，研究木犀草素及其 S BE-β-C D包合物在大鼠體內(nèi)的藥代動力學(xué)。方法：通過灌胃和尾靜脈注射兩種方式分別給予 SD大鼠木犀草素與木犀草素/SBE-β-CD包合物，液液萃取法處理血漿

7、樣品，以0.2%H3PO4-甲醇（48:52）為流動相，采用HPLC法測定血漿樣品中木犀草素的含量，得到相關(guān)藥代學(xué)參數(shù)。結(jié)果：方法學(xué)考察結(jié)果顯示，大鼠血漿中的木犀草素在0.06~13.00μg/mL范圍內(nèi)有良好的線性關(guān)系；日內(nèi)精密度與日間精密度的 RS D分別在5.43~13.33%和7.89~14.29%之間，回收率在89.85~113.85%和88.69~~107.69%之間；木犀草素的提取回收率為72.19-86.62%，R S

8、D為5.60-12.77%；內(nèi)標(biāo)的提取回收率為70.24-75.30%， R S D為4.69-11.99%；血漿樣品4℃放置24小時、反復(fù)凍融3次、-20℃放置一個月后穩(wěn)定性良好。藥代數(shù)據(jù)顯示，木犀草素經(jīng) S BE-β-C D包合后達峰時間提前，藥-時曲線下面積增大，生物利用度提高。結(jié)論：HP LC法適用于木犀草素在大鼠血漿中的含量測定，可用于藥代動力學(xué)研究。木犀草素經(jīng) S BE-β-C D包合后生物利用度提高，一方面由于木犀草素/S