EZH2調(diào)控人頭頸部鱗癌生長的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、分 類 號(hào)： 號(hào)：R739.86 學(xué)校代碼： 學(xué)校代碼：1 0 0 6 2 密 級(jí)： 級(jí)：學(xué) 號(hào)： 號(hào)： 2013602226 學(xué)位類別： 學(xué)位類別： 科學(xué)學(xué)位? 專業(yè)學(xué)位? 學(xué)科門類： 學(xué)科門類：醫(yī)學(xué) 醫(yī)學(xué) 碩 士 學(xué) 位 論 文 MASTER’S DISSERTATION 論文題目： 論文題目

2、：EZH2 調(diào)控人 調(diào)控人頭頸部鱗癌生 頭頸部鱗癌生長的實(shí)驗(yàn)研究 長的實(shí)驗(yàn)研究 T I T L E EZH2 regulates tumor growth in HNSCC in vitro and in vivo 一級(jí)學(xué)科： 一級(jí)學(xué)科：臨床醫(yī)學(xué) 臨床醫(yī)學(xué) 二級(jí)學(xué)科： 二級(jí)學(xué)科：腫瘤學(xué) 腫瘤學(xué) 論文作者： 論文作者：孔令平 孔令平 導(dǎo) 師： 師：張 侖 導(dǎo)師組成員： 導(dǎo)師組成員：周 旋 天 津 醫(yī) 科 大 學(xué) 研 究 生

3、 院 二〇一六 二〇一六 年 四 月 天津醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文 I 中文摘要 近年來，頭頸部鱗癌的患病率逐漸增加。且頭頸部鱗癌患者的病情進(jìn)展較快，治療效果及預(yù)后均不理想。盡管對(duì)于頭頸部鱗癌的診斷與治療方面已經(jīng)有了明顯的發(fā)展與突破，但是每年死于頭頸部鱗癌的患者仍很多。因此研究頭頸部鱗癌細(xì)胞的生長，尋找頭頸部鱗狀細(xì)胞癌新的有效治療靶點(diǎn)是當(dāng)前改善頭頸部鱗癌患者治療效果的重要突破口。 Zest 同源增強(qiáng)子(EZH2)是組成多梳蛋白 PRC2 復(fù)

4、合物的核心亞基， 它可以催化組蛋白 H3K27 三甲基化介導(dǎo)其下游靶基因轉(zhuǎn)錄沉默，其中腫瘤的發(fā)生與發(fā)展過程中尤為重要。EZH2 如何調(diào)控腫瘤細(xì)胞凋亡的報(bào)道并不多，對(duì)于 EZH2 影響頭頸部鱗狀細(xì)胞癌細(xì)胞凋亡和腫瘤生長的報(bào)道更屬空白。線粒體鈣離子攝入蛋白 1 (MICU1)是線粒體依賴性死亡途徑的負(fù)調(diào)控因子。本文采用通過采用 EZH2的小分子抑制劑 DZNEP 抑制頭頸部鱗癌細(xì)胞表達(dá)及功能作用，另外還選取MICU1 的表達(dá)及干擾質(zhì)粒改變

5、HNSCC 細(xì)胞中 MICU1 的表達(dá)水平， 對(duì) EZH2 調(diào)控細(xì)胞凋亡以及腫瘤生長的作用效果和機(jī)制進(jìn)行了以下體內(nèi)外實(shí)驗(yàn)研究。研究共分為三部分： 第一部分：對(duì)天津醫(yī)科大學(xué)腫瘤醫(yī)院的 97 例不同級(jí)別與分期的 HNSCC 組織標(biāo)本提取蛋白， 運(yùn)用免疫組化染色法檢測組織標(biāo)本切片中 EZH2 的定位及表達(dá)情況。結(jié)合癌癥基因組圖譜（TCGA）的生存分析研究 HNSCC 中 EZH2 表達(dá)水平與 HNSCC 不良預(yù)后的相關(guān)性。采用 Western

6、 blot 方法檢測 5 個(gè) HNSCC 細(xì)胞系 EZH2 及 MICU1 蛋白的表達(dá)情況。 第二部分：MTT 法測定 DZNEP 對(duì)兩舌癌細(xì)胞的半數(shù)致死量（IC50）及 對(duì)細(xì)胞活性的抑制能力； 平板克隆實(shí)驗(yàn)檢測 DZNEP 對(duì)單個(gè)細(xì)胞的克隆形成能力的影響；Western blot 檢測細(xì)胞株 DZNEP 處理后相關(guān)蛋白的表達(dá)變化。流式細(xì)胞術(shù)檢測細(xì)胞凋亡比率以及細(xì)胞周期的分布情況；β-半乳糖苷酶染色法檢測抑制EZH2 的表達(dá)后 HNSC