厄洛替尼聯(lián)合放射治療對裸鼠A549肺腺癌的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的：
　　厄洛替尼(Erlotinib)是一種表皮生長因子酪氨酸激酶抑制劑(EGFR-TKI)，通過阻斷EGF R信號通路多級磷酸化，抑制腫瘤細(xì)胞惡性增殖、細(xì)胞遷移、細(xì)胞侵襲，削弱腫瘤細(xì)胞粘附能力，誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡，臨床研究顯示其治療惡性腫瘤呈現(xiàn)一定的優(yōu)勢。厄洛替尼作為分子靶向藥物與放療聯(lián)合治療腫瘤組織，能有效緩解腫瘤放療抵抗，提高同步放射治療的效果，呈現(xiàn)良好的抗腫瘤作用，具有潛在價(jià)值及良好應(yīng)用前景。本課題通過體外建立人肺腺癌

2、A549細(xì)胞裸鼠移植瘤模型，在整體動(dòng)物水平上探討厄洛替尼聯(lián)合放射治療對肺腺癌的治療作用。
　　方法：
　　體外建立人肺腺癌A549細(xì)胞裸鼠移植瘤模型，設(shè)置空白對照組(Control)，放療組(X-ray)，厄洛替尼組(Erlotinib)，及厄洛替尼+放療聯(lián)合治療組(Erlotinib+X-ray)，隔天測量各實(shí)驗(yàn)組別移植瘤長徑及短徑，記錄裸鼠重量，計(jì)算移植瘤體積以及移植瘤生長抑制率，繪制移植瘤生長曲線。治療結(jié)束后剝離移植瘤

3、進(jìn)行稱重，觀察各實(shí)驗(yàn)組別治療期間變化情況。眼球取血法檢測各實(shí)驗(yàn)組別小鼠血生化、血常規(guī)指標(biāo)，病理學(xué)方法檢查治療期間厄洛替尼對各主要組織器官的毒性影響。通過免疫組化分析厄洛替尼聯(lián)合放療后移植瘤組織中Caspase3、Akt以及p27蛋白水平的表達(dá)變化。
　　結(jié)果：
　?。?）人肺腺癌A549細(xì)胞裸鼠移植瘤模型成功建立，治療結(jié)束剝離空白對照組(Control)，放療組(X-ray)，厄洛替尼組(Erlotinib)，及厄洛替尼+放

4、療聯(lián)合治療組（Erlotinib+ X-ray)移植瘤稱重可見，Erlotinib+X-ray組移植瘤重量為(0.82±0.11) g，小于Control組(1.35±0.15) g(P＜0.01)，小于X-ray組(1.02±0.13)g(P＜0.01)，小于Erlotinib組(0.99±0.08) g(P＜0.05)。
　?。?）移植瘤生長曲線結(jié)果表明伴隨治療時(shí)間增加，Erlotinib組、X-ray組移植瘤體積較Contr

5、ol組呈現(xiàn)縮小趨勢，而Erlotinib+X-ray組相較X-ray組移植瘤體積縮小趨勢明顯。移植瘤生長抑制率分析結(jié)果表明厄洛替尼聯(lián)合放療能有效抑制腫瘤組織的生長。
　　（3）摘眼球取血法Control組， X-ray組， Erlotinib組，及Erlotinib+X-ray組小鼠血生化、血常規(guī)指標(biāo)的變化，血生化檢測結(jié)果表明ALT、AS T、BUN、CRE、LDH均無明顯變化，方差分析各組間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。血常

6、規(guī)結(jié)果表明各項(xiàng)指標(biāo)組間均無明顯變化，無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。
　　HE染色檢查Control組， Erlotinib組， X-ray組，Erlotinib+X-ray組各主要臟器即心、肝、脾、肺、腎無明顯的病理學(xué)變化。
　　免疫組化結(jié)果顯示，Control組、Erlotinib組，X-ray組Caspase3、p27蛋白表達(dá)升高，Erlotinib+X-ray組與X-ray組相比，Caspase3、p27蛋白表達(dá)明顯升

7、高。Control組、Erlotinib組中 Akt表達(dá)較多，X-ray組的Akt蛋白水平有所下降，Erlotinib+X-ray組的Akt蛋白水平較單獨(dú)放療組明顯下降。組間比較具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。
　　結(jié)論：
　　本研究在整體動(dòng)物水平上顯示厄洛替尼作為分子靶向藥物聯(lián)合放射治療能有效抑制移植瘤的生長，誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡執(zhí)行者Caspase3及抑癌基因p27蛋白的表達(dá)，同時(shí)也能夠抑制抗凋亡基因Akt蛋白的表達(dá)。厄洛替尼聯(lián)