川西高原自然發(fā)酵牦牛酸奶中乳酸菌遺傳多樣性及優(yōu)良菌株篩選.pdf

1、論文獨創(chuàng)性聲明明：所呈交的學(xué)位論文是我個人在導(dǎo)師指導(dǎo)下進行研究工作所取得的成果。除了文中特別加以標注和致謝的地方外，學(xué)位論文中不包含其他個人或集體撰寫過的研究成果，也不包含為獲得四川農(nóng)業(yè)大學(xué)或其它教育機構(gòu)的學(xué)位或過的材料。與我一同工作的同志對本研究所做的任何貢獻均已在論文中作了并表示了謝意。研究生簽名：弋眇澎≯加年莎月≯2，日關(guān)于論文使用授權(quán)的聲明本人完全了解四川農(nóng)業(yè)大學(xué)有關(guān)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定，即：學(xué)校有權(quán)保留并向國家有關(guān)部門或機

2、構(gòu)送交論文的復(fù)印件和電子版，允許論文被查閱和借閱，可以采用影印、縮印或掃描等復(fù)制手段保存、匯編學(xué)位論文。同意i四)Jl農(nóng)業(yè)大學(xué)可以用不同方式在不同媒體上發(fā)表、傳播學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容。論文作者簽名：Ⅵ礦≯易新躲≯哆時間：加／年鄉(xiāng)月Z≥日時間：∥7汐年莎月盔2El中文摘要ⅢIllrlrllrlrlJIIIJIIIIIIIIIFJuPY1801503采用16SrDNAPCRRFLP和16“23SrDNA的ISRPCRRFLP分析技術(shù)研究

3、了分離自川西高原自然發(fā)酵牦牛酸奶子中的82株乳酸菌和11株參比菌株的遺傳多樣性，并用16SrDNA基因序列分析技術(shù)研究了供試菌株與參比菌株的系統(tǒng)發(fā)育關(guān)系。在對82株供試菌株的單株發(fā)酵乳的口感比對，酸度測定、凝乳時間的基礎(chǔ)上，篩選出6株凝乳質(zhì)量好，具有良好口感的乳酸菌株，并對其發(fā)酵特性及系統(tǒng)發(fā)育關(guān)系進行了研究，結(jié)果如下：116SrDNA基因擴增產(chǎn)物的酶切分析表明，在用于酶切試驗的5種酶中，MspI酶切條帶最豐富，所揭示的遺傳信息量大，能很

4、好地揭示供試菌株的遺傳多樣性。依酶切結(jié)果聚類和代表菌株的系統(tǒng)發(fā)育關(guān)系研究結(jié)果，供試菌株在61％相似水平上可分為4個類群，類群I、II、Ⅳ為主要類群，類群I和Ⅳ菌株為乳桿菌屬(Lactobacillus)，類群Ⅱ為腸球菌屬(Enterococcus)。如果按81％的相似系數(shù)聚類，供試菌株可聚類16個群。酶切結(jié)果顯示，供試菌株共有23種16SrDNA遺傳型，其中編號為1，3，7和15的遺傳型是主要遺傳型，編號為7的遺傳型共40株，占供試菌株

5、的42％。4個16SrDNA主要遺傳型(編號1、3、7和15)，在按61％相似水平的聚類中，編號1、3和15的三個主要遺傳型16SrDNA菌株是第1類群的主要菌株；編號為7的遺傳型菌株全部為第Ⅳ群菌株。按照81％相似水平聚類的分群結(jié)果，對各類群代表菌株進行16SrDNA序列分析，供試菌株中可能有植物乳桿菌(Lactobacillusplantarun)或戊糖乳桿菌(Lactobacilluspentosus)、干酪乳桿菌群(Lactob

6、acilluscaseiGroup)、發(fā)酵乳桿菌(Lactobacillusfermentum)、副干酪乳桿菌(Lactobacillusparacasei)糞腸球菌(Enterococcusfaecalis)以及耐久腸球菌(Enterococcusdurans)等類群。2依供試菌株的16SrDNA基因酶切分析聚類的各類群代表菌株的系統(tǒng)發(fā)育研究結(jié)果表明，代表菌株與典型菌株的16SrDNA基因序列的相似度基本都在98％以下，顯示出川西高原