黃芪甲苷對(duì)胃癌SGC7901-DDP細(xì)胞多藥耐藥性的逆轉(zhuǎn)作用及其機(jī)制研究.pdf

1、研究目的:
　　初步探考黃芪甲苷逆轉(zhuǎn)人胃癌耐藥細(xì)胞株SGC7901/DDP多藥耐藥性的作用以及其可能機(jī)制。
　　研究方法:
　　1.MTT法鑒定SGC7901/DDP細(xì)胞對(duì)順鉑的耐藥性;
　　2.MTT法測(cè)定黃芪甲苷和維拉帕米的細(xì)胞毒性，選取兩種藥物的無毒濃度進(jìn)行下一步的實(shí)驗(yàn)。
　　3.以逆轉(zhuǎn)劑維拉帕米作為陽性對(duì)照，MTT法測(cè)定無毒濃度的黃芪甲苷逆轉(zhuǎn)SGC7901/DDP細(xì)胞多藥耐藥性的作用;
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2、.RT-PCR法檢測(cè)黃芪甲苷對(duì)MDR1基因表達(dá)的影響;
　　5.Western bolt法觀察黃芪甲苷對(duì)MDR1基因編碼產(chǎn)物P-gp表達(dá)的影響，推測(cè)黃芪甲苷逆轉(zhuǎn)耐藥的可能機(jī)制。
　　研究結(jié)果:
　　1.SGC7901/DDP細(xì)胞對(duì)順鉑的敏感性明顯弱于SGC7901細(xì)胞，相對(duì)耐藥指數(shù)為3.26，說明該細(xì)胞具有耐藥性。
　　2.黃芪甲苷能抑制SGC7901/DDP耐藥細(xì)胞的增殖，并呈時(shí)效及量效關(guān)系，維拉帕米對(duì)耐藥細(xì)胞

3、有強(qiáng)大的增殖抑制作用，且累積毒性明顯。0.02、0.04、0.08mg/mL黃芪甲苷及10μg/mL維拉帕米對(duì)SGC7901/DDP細(xì)胞的抑制率均不超過10％，可作為無毒濃度。
　　3.黃芪甲苷能增加SGC7901/DDP細(xì)胞對(duì)順鉑的敏感性而實(shí)現(xiàn)多藥耐藥性的逆轉(zhuǎn)，并有濃度依賴性，0.02、0.04、0.08mg/mL黃芪甲苷作用24h后，細(xì)胞抑制率分別為11.07±1.09、16.29±1.32和24.63±1.68，均高于對(duì)照組

4、的8.97±1.07，相對(duì)逆轉(zhuǎn)倍數(shù)依次為1.23、1.82和2.75，10μg/mL維拉帕米的相對(duì)逆轉(zhuǎn)指數(shù)為4.67。
　　4.RT-PCR結(jié)果顯示經(jīng)不同濃度的黃芪甲苷處理后的SGC7901/DDP細(xì)胞MDR1mRNA水平均有所下降。
　　5.Western bolt結(jié)果顯示隨著黃芪甲苷濃度增加，P-gp相對(duì)表達(dá)量逐漸下降，0.08mg/ml黃芪甲苷能明顯下調(diào)P-gp的表達(dá)水平。
　　研究結(jié)論:
　　本實(shí)驗(yàn)證明了