Wnt-β--catenin信號在狼瘡腎炎病理發(fā)生中的作用及鑒別診斷價(jià)值研究.pdf

1、系統(tǒng)性紅斑狼瘡(systemic lupus erythematosus，SLE)在亞洲人群的發(fā)病率及嚴(yán)重程度高于其他人群，被認(rèn)為是亞洲疾病(Asia disease)，其中狼瘡性腎炎（lupus nephritis，LN）為SLE患者最常見的合并癥之一，也是SLE主要死亡原因之一。因此，對于LN SLE的研究越來越受到關(guān)注與重視。研究表明，Wnt/β-catenin信號和白介素6(IL-6)參與不同類型自身免疫性疾病的發(fā)生，證據(jù)表明W

2、nt/β-catenin信號能夠通過TLR信號調(diào)節(jié)細(xì)胞的抗感染和炎癥反應(yīng)。而包括IL-6在內(nèi)的炎性因子是LN SLE病理發(fā)生過程的一個(gè)關(guān)鍵因子，但目前對于LN SLE發(fā)病及進(jìn)展的分子機(jī)制仍然遠(yuǎn)未闡明，對于Wnt/β-catenin和IL-6信號之間是否存在交互作用并在在LN的致病中發(fā)揮作用與機(jī)制還未有研究報(bào)道。
　　本研究一方面以腎小球系膜細(xì)胞系為基礎(chǔ)，建立狼瘡腎炎模型，體外分析腎小球系膜細(xì)胞系在LN-SLE患者血清免疫復(fù)合物（i

3、mmune complex，IC）、白介素6(IL-6)和/或抗白介素6抗體(Anti IL-6)作用后Wnt/β-catenin信號的變化，以揭示W(wǎng)nt/β-catenin信號與IL-6相互作用對LN的發(fā)病機(jī)制的影響，結(jié)果發(fā)現(xiàn)外源性LN-SLE患者血清IC能夠抑制Wnt/β-catenin信號活性，胞漿中Wnt信號活性抑制基因GSK3β表達(dá)上調(diào)，而細(xì)胞核內(nèi)Wnt/β-catenin的效應(yīng)基因β-catenin、轉(zhuǎn)錄因子TCF-4以及靶

4、基因Cyclin D1表達(dá)均下調(diào);相反，外源性給予IL-6作用于人腎小球系膜細(xì)胞導(dǎo)致胞漿中Wnt信號抑制基因GSK3β表達(dá)下調(diào)，而細(xì)胞核內(nèi)Wnt/β-catenin的效應(yīng)基因β-catenin、轉(zhuǎn)錄因子TCF-4以及靶基因Cyclin D1和Axin1同樣表達(dá)均上調(diào)。
　　另一方面通過ELISA方法檢測111例SLE患者體液（血清、尿液）中Wnt/β-catenin信號Wnt3a配體、FZD8受體以及其抑制因子DKK1等蛋白的含量

5、，統(tǒng)計(jì)分析揭示體液中Wnt/β-catenin信號與并發(fā)LN的SLE患者(LN SLE)臨床的相關(guān)性。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，SLE患者組血清和尿液中DKK1水平均高于對照組(p＜0.0001)，這與血清IC刺激人腎小球系膜細(xì)胞能夠抑制Wnt/β-catenin信號結(jié)果一致，而Wnt3a、FZD8的表達(dá)水平?jīng)]有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。有趣的是，LN SLE患者組血清和尿液中DKK1、Wnt3a水平同樣高于Non-LN SLE(p＜0.001)，而FZD8水平?jīng)]有

6、統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。并依據(jù)其ROC曲線以及多因素回歸分析曲線發(fā)現(xiàn)，血清中DKK1曲線下面積為0.783，因此，血清中DKK1可作為鑒別并發(fā)狼瘡腎炎的SLE患者的診斷生物標(biāo)志。以上體外研究表明，血清IC刺激腎小球系膜細(xì)胞時(shí)，通過上調(diào)Wnt信號負(fù)調(diào)控因子Axin1和GSK3β而降低Wnt/β-catenin信號活性，并下調(diào)核內(nèi)靶基因Cyclin D1、轉(zhuǎn)錄因子TCF-4，從而促進(jìn)炎癥反應(yīng)發(fā)生。血清中DKK1可以作為臨床上鑒別診斷LN SLE的血清學(xué)