成纖維細胞生長因子抑制劑BGJ398對腎癌增殖、粘附和侵襲功能的相關(guān)研究.pdf

1、本課題主要是通過細胞藥物實驗明確成纖維細胞生長因子抑制劑對腎癌細胞的腎癌增殖、粘附和侵襲功能影響，從而為治療腎癌提供新的治療方法。腎細胞癌(renal cell carcinoma，RCC)是最常見的一種腎惡性腫瘤類型，發(fā)病率約占人類惡性腫瘤的3％，在泌尿系惡性腫瘤中占第二位。成纖維細胞生長因子（fibroblast growth factor FGF）是生長因子超家族的一員，其主要發(fā)揮組織修復、促進血管生成、骨骼形成、胚胎發(fā)育等重要作

2、用，可能與腫瘤的分化、浸潤、生長、轉(zhuǎn)移等有關(guān);且多項研究認為腫瘤患者血液中FGFSs水平升高，并有研究發(fā)現(xiàn)，腫瘤患者血液中FGFs水平越高，其惡性程度越高[29]。由于腫瘤細胞可增強表達FGF基因，通過旁分泌分泌FGFs，促進腫瘤血管新生，增加腫瘤組織的血應，促進腫瘤的生長;且腫瘤細胞本身FGF受體可有過表達，通過自分泌方式可以促進腫瘤細胞生長，因此阻斷FGF信號傳導途徑至少在減少血管生成一方面可以抑制腫瘤生長。早在1991年K Fuj

3、imoto等研究發(fā)現(xiàn)腎癌患者血清中FGF水平明顯增高，其水平與腫瘤分期及進展情況相關(guān);I Tsimafeyeu等研究發(fā)現(xiàn)RCC細胞表面中成纖維細胞生長因子(fibroblast growth factor receptor，F(xiàn)GFR)FGFR1、FGFR2過度表達;而正常腎細胞表面FGFR1表達少于2.2％，F(xiàn)GFR2不表達。國內(nèi)有也有多位學者針對RCC細胞表面FGFR相關(guān)研究發(fā)現(xiàn)了FGFR的過表達。有研究發(fā)信現(xiàn)成纖維細胞生長因子抑制劑

4、可抑制腎癌進展，延長無進展生存時間。由于多數(shù)FGFs發(fā)揮生物活性需結(jié)合肝素和硫酸肝素，目前FGFs抑制劑如蘇拉明、反應停已進入臨床試驗，其通過電荷吸引作用結(jié)合FGFs阻斷與肝素結(jié)合抑制FGFS生物效應;但由于其特異性差，副作用較大，針對FGFR的抑制劑已發(fā)展至第二代，其中第二代FGFR具有特異性高，副反應較少的特點。BGJ398是一種高選擇性的FGFR抑制劑，作用于FGFR1、FGFR2和FGFR3，其對膠質(zhì)母細胞瘤、黑色素瘤、肺癌等的

5、治療作用已經(jīng)進入了Ⅱ期臨床試驗階段。其對腎細胞癌的治療作用目前暫不明確，需進一步研究明確。
　　主要內(nèi)容與結(jié)論:
　　實驗方法:用不同濃度0、0.1、0.5、1、2、5、10μmol/L的FGFR抑制劑BGJ398處理體外培養(yǎng)的人源腎癌細胞OS-RC-2后，通過MTT法檢測細胞增殖變化;激光共聚焦顯微鏡觀察對細胞的活力和骨架的影響;Transwell小室法檢測BGJ398對人腎癌細胞侵襲能力的影響。
　　結(jié)論:MTT結(jié)

6、果顯示BGJ398處理OS-RC-2細胞48h后，細胞的相對增殖率RGR隨作用濃度的增高而逐漸降低。BGJ398的濃度為10μmol/L時，細胞的相對增殖率僅僅為3.5％。結(jié)果說明BGJ398對腎癌細胞的增殖具有明顯的抑制作用。采用熒光染色實驗提示當BGJ398濃度大于5μmol/L時，視野下僅有死細胞存在。該結(jié)果說明BGJ398可顯著抑制人腎癌細胞的活力。BGJ398可顯著抑制人腎癌細胞鋪展和黏著斑形成。Transwell小室顯示當B