逍遙散干預(yù)PolyI-C誘導(dǎo)小鼠肝郁證的作用研究.pdf

1、目的：
　　建立PolyI∶C誘導(dǎo)小鼠肝郁證模型，探討逍遙散對(duì)PolyI∶C誘導(dǎo)小鼠肝郁模型的作用及其作用機(jī)制。
　　方法：
　　1.PolyI∶C誘導(dǎo)小鼠肝郁證模型的建立:
　　第一批:將40只C57小鼠隨機(jī)分為4組，對(duì)照組、3mg/kg PolyI∶C組、6mg/kg PolyI∶C組、12mg/kg PolyI∶C組。除對(duì)照組外，其余三組予腹腔注射相應(yīng)濃度的PolyI∶C溶液，用藥1天。第二批:將20只C5

2、7小鼠隨機(jī)分為2組，對(duì)照組、12mg/kg Poly I∶C造模組。造模組予腹腔注射12mg/kg Poly I∶C溶液，對(duì)照組予腹腔注射生理鹽水，連續(xù)3周。第三批:將60只C57小鼠隨機(jī)分為6組，對(duì)照組、模型組、逍遙散低、中、高劑量組、艾司西酞普蘭組。除對(duì)照組外，其余三組予腹腔注射PolyI∶C，在造模前30分鐘予灌胃給藥，每天1次，連續(xù)3周。
　　2.動(dòng)物模型的評(píng)價(jià)
　　在造模后運(yùn)用曠場(chǎng)實(shí)驗(yàn)、糖水偏好實(shí)驗(yàn)、強(qiáng)迫游泳實(shí)驗(yàn)、

3、懸尾實(shí)驗(yàn)等評(píng)價(jià)行為學(xué)指標(biāo)。
　　3.動(dòng)物組織樣品的采集與檢測(cè)
　　在完成造模和行為學(xué)實(shí)驗(yàn)后，將小鼠麻醉，經(jīng)心臟采血后進(jìn)行灌注，并采集小鼠大腦組織，用于免疫熒光分析、免疫印跡和酶聯(lián)免疫測(cè)定。
　　結(jié)果：
　　1.高劑量PolyI∶C連續(xù)3周造模能成功建立小鼠肝郁證模型。與對(duì)照組比較，12mg/kg Poly I∶C組的小鼠中央?yún)^(qū)域停留時(shí)間明顯減少(P＜0.05)，糖水偏好分?jǐn)?shù)明顯下降(P＜0.05)，懸尾實(shí)驗(yàn)和強(qiáng)迫

4、游泳實(shí)驗(yàn)的不動(dòng)時(shí)間延長(zhǎng)(P＜0.05)。
　　2.逍遙散能改善PolyI∶C誘導(dǎo)的小鼠抑郁樣行為。與模型組比較，高劑量逍遙散組糖水偏好分?jǐn)?shù)顯著升高(P＜0.05)，懸尾實(shí)驗(yàn)和強(qiáng)迫游泳實(shí)驗(yàn)的不動(dòng)時(shí)間明顯減少(P＜0.05)。
　　3.逍遙散能調(diào)節(jié)PolyI∶C誘導(dǎo)的前額皮質(zhì)、VTA、NAc炎癥細(xì)胞因子。與模型組比較，高劑量逍遙散和西酞普蘭均能降低前額皮質(zhì)顯著升高的IL-1β、IL-6及TNF-α的水平(P＜0.05);高劑量逍

5、遙散可以降低VTA顯著升高的IL-6水平(P＜0.05)，而西酞普蘭能下調(diào)IL-1β、IL-6及TNF-α的水平(P＜0.05);高劑量逍遙散和西酞普蘭均能降低NAc顯著升高的IL-6及TNF-α水平(P＜0.05)。
　　4.逍遙散能下調(diào)PolyI∶C造模后小鼠前額皮質(zhì)、VTA、NAc升高的小膠質(zhì)細(xì)胞數(shù)。與模型組比較，高劑量逍遙散和西酞普蘭能下調(diào)前額皮質(zhì)中顯著升高的小膠質(zhì)細(xì)胞數(shù)(P＜0.05);高劑量逍遙散和艾司西酞普蘭能下調(diào)V

6、TA顯著升高的小膠質(zhì)細(xì)胞數(shù)(P＜0.05)，西酞普蘭還能下調(diào)VTA升高的星型膠質(zhì)細(xì)胞數(shù)(P＜0.05);高劑量逍遙散和西酞普蘭能下調(diào)NAc顯著升高的小膠質(zhì)細(xì)胞數(shù)(P＜0.05)。
　　5.逍遙散改善PolyI∶C誘導(dǎo)肝郁證的作用可能與調(diào)節(jié)IDO、p38、GCH1蛋白的表達(dá)有關(guān)。在前額皮質(zhì)中，IDO和p38表達(dá)升高，逍遙散和西酞普蘭能下調(diào)其表達(dá)。在VTA中，GCH1表達(dá)升高，逍遙散和西酞普蘭均能下調(diào)其表達(dá)。在NAc中，p38、GCH