局部晚期非小細(xì)胞肺癌的治療結(jié)果及預(yù)后相關(guān)microRNA研究.pdf

1、本文主要從以下幾個(gè)部分展開論述:
　　第一部分 局部晚期非小細(xì)胞肺癌同步放化療的治療結(jié)果
　　目的:評(píng)價(jià)局部晚期非小細(xì)胞肺癌(non-small-cell lung cancer, NSCLC)患者同步放化療的療效和不良反應(yīng)。
　　方法:回顧性分析2001年1月至2010年12月間初治接受同步放化療的251例局部晚期NSCLC患者的臨床資料，其中Ⅲa期76例，Ⅲb期175例。放療中位劑量為60 Gy，其中調(diào)強(qiáng)放療(in

2、tensity modulated radiation therapy, IMRT)174例，三維適形放療(three dimensional-conformal radiotherapy,3D-CRT)51例，常規(guī)放療26例。全組患者接受EP方案（依托泊苷加順鉑）化療112例，接受PC方案（紫杉醇加卡鉑）化療99例，接受拓?fù)涮婵祮嗡幓?8例，接受其他方案化療22例。分析同步放化療的療效及不良反應(yīng)。
　　結(jié)果:全組有244例患者

3、可評(píng)價(jià)近期療效，其中完全緩解(complete response，CR)6例(2.5％)，部分緩解(partial response，PR)183例(75.0％)，疾病穩(wěn)定(stable disease，SD)42例(17.2％)，疾病進(jìn)展(progressive disease，PD)13例(5.3％)。全組患者中位隨訪時(shí)間62個(gè)月，中位生存時(shí)間為21個(gè)月，其1、3、5年生存率分別為69.2％、31.2％和23.2％。全組患者中位無(wú)進(jìn)

4、展生存時(shí)間為10個(gè)月，其1、3、5年無(wú)進(jìn)展生存率分別為40.9％、22.1％和17.7％。Ⅲa期和Ⅲb期NSCLC患者的5年生存率分別為29.2％和20.7％，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p=0.133)。全組有244例患者可評(píng)價(jià)治療失敗模式，其中61例(25.0％)出現(xiàn)局部區(qū)域進(jìn)展，55例(22.5％)出現(xiàn)遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移，77例(31.6％)出現(xiàn)局部區(qū)域進(jìn)展+遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移。≥3級(jí)放射性肺炎、放射性食管炎及白細(xì)胞減少的發(fā)生率分別為4.4％、11.2％和26

5、.7％。
　　結(jié)論:局部晚期NSCLC同步放化療的療效較好，不良反應(yīng)患者可耐受。同步放化療是不可手術(shù)的局部晚期NSCLC的標(biāo)準(zhǔn)治療。
　　第二部分 局部晚期非小細(xì)胞肺癌同步放化療后的鞏固化療結(jié)果分析
　　目的:對(duì)于局部晚期非小細(xì)胞肺癌(non-small-cell lung cancer, NSCLC)患者，同步放化療后鞏固化療的作用尚存在爭(zhēng)議?；诖?，本研究旨在分析鞏固化療的療效和毒性。
　　方法:回顧性分析2

6、001年1月至2010年12月在我院接受根治性同步放化療的局部晚期NSCLC患者的病例資料。
　　結(jié)果:203例患者中，113例(55.7％)接受了鞏固化療。中位鞏固化療周期數(shù)為3個(gè)，89.4％的患者完成了≥2周期的鞏固化療。鞏固化療組的總生存(overall survival，OS)顯著優(yōu)于非鞏固化療組(中位OS，27個(gè)月vs.16個(gè)月;5年OS，30.4％ vs.22.5％;p=0.012)。鞏固化療組和非鞏固化療組的中位無(wú)進(jìn)

7、展生存(progression free survival，PFS)分別為12個(gè)月和9個(gè)月(p=0.291)。亞組分析顯示男性(HR:0.63;95％ CI，0.44-0.90)、年齡＜60歲(HR:0.63;95％ CI，0.42-0.95)、非鱗狀細(xì)胞癌(HR:0.44;95％CI，0.25-0.76)、療前卡氏評(píng)分≥80(HR:0.67;95％ CI，0.48-0.93)、Ⅲb期(HR:0.64;95％ CI，0.43-0.95)

8、、同步放化療后療效為穩(wěn)定(stable disease，SD)(HR:0.31;95％CI，0.14-0.65)和放療劑量≥60 Gy(HR:0.69;95％ CI，0.48-1.00)的患者能夠從鞏固化療中顯著獲益。毒性方面，鞏固化療組≥3級(jí)的血液學(xué)毒性發(fā)生率更高，但是兩組差異沒有達(dá)到統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(45.1％ vs.34.4％;p=0.123)。
　　結(jié)論:同步放化療的基礎(chǔ)上加以鞏固化療可能能夠進(jìn)一步延長(zhǎng)局部晚期NSCLC患者的生

9、存而并沒有增加治療相關(guān)毒性，特別是對(duì)于男性、年齡＜60歲、非鱗癌、療前卡氏評(píng)分≥80、Ⅲb期、SD和放療劑量≥60 Gy的患者。但該研究結(jié)果仍然需要大規(guī)模前瞻性研究的證實(shí)。
　　第三部分 MicroRNA-29c靶向VEGFA抑制肺腺癌進(jìn)展的機(jī)制研究
　　目的:肺腺癌具有侵襲性強(qiáng)和預(yù)后異質(zhì)性大的特點(diǎn)，目前其發(fā)生發(fā)展的機(jī)制尚未被闡明。越來(lái)越多的證據(jù)顯示microRNAs(miRNAs)的異常調(diào)控與多種腫瘤的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)。本

10、研究目的為尋找肺腺癌的預(yù)后相關(guān)miRNA并研究其影響腫瘤進(jìn)展的機(jī)制。
　　方法:對(duì)87例病理證實(shí)為Ⅲa-N2期肺腺癌的福爾馬林固定石蠟包埋(formalin-fixedparaffin-embedded，F(xiàn)FPE)標(biāo)本進(jìn)行miRNA芯片檢測(cè)以尋找預(yù)后相關(guān)miRNA。采用脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染法瞬時(shí)轉(zhuǎn)染miR-29c過(guò)表達(dá)和干擾質(zhì)粒，MTS實(shí)驗(yàn)檢測(cè)細(xì)胞增殖能力變化，Transwell實(shí)驗(yàn)檢測(cè)細(xì)胞遷移/侵襲能力變化。生物信息學(xué)和雙熒光素酶報(bào)告基因

11、實(shí)驗(yàn)預(yù)測(cè)和驗(yàn)證miR-29c與靶基因的關(guān)系，將miR-29c過(guò)表達(dá)和抑制后通過(guò)qRT-PCR、ELISA和Western blot檢測(cè)靶基因mRNA、分泌蛋白和細(xì)胞內(nèi)的蛋白變化。利用人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞(human umbilical vein endothelial cell，HUVEC)成管實(shí)驗(yàn)檢測(cè)miRNA對(duì)血管生成的影響。通過(guò)免疫組化（Immunohistochemistry, IHC）檢測(cè)患者FFPE標(biāo)本中miR-29c與微血管密

12、度(microvessel density, MVD)和靶基因表達(dá)的相關(guān)性。
　　結(jié)果:miRNA芯片及生存分析結(jié)果顯示miR-29c表達(dá)下調(diào)與患者的不良預(yù)后顯著相關(guān)。在體外實(shí)驗(yàn)中miR-29c抑制細(xì)胞增殖、遷移和侵襲。生物信息學(xué)和雙熒光素酶報(bào)告基因?qū)嶒?yàn)發(fā)現(xiàn)miR-29c能夠直接結(jié)合血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子A(vascularendothelial growth factor A，VEGFA)的3'-UTR區(qū)域，qRT-PCR、ELISA

13、和Western blot實(shí)驗(yàn)結(jié)果發(fā)現(xiàn)miR-29c能夠在轉(zhuǎn)錄和翻譯水平下調(diào)VEGFA的表達(dá)。體外實(shí)驗(yàn)中miR-29c能夠抑制HUVEC成管。高表達(dá)VEGFA能夠基本完全逆轉(zhuǎn)miR-29c導(dǎo)致的細(xì)胞增殖、遷移/侵襲和血管生成能力下降。在患者FFPE標(biāo)本中miR-29c與MVD和VEGFA的表達(dá)具有顯著相關(guān)性。
　　結(jié)論:miR-29c通過(guò)靶向VEGFA在肺腺癌的進(jìn)展中發(fā)揮抑癌作用，miR-29c有望作為肺腺癌預(yù)后的分子標(biāo)志物和有價(jià)