版權(quán)說明:本文檔由用戶提供并上傳,收益歸屬內(nèi)容提供方,若內(nèi)容存在侵權(quán),請(qǐng)進(jìn)行舉報(bào)或認(rèn)領(lǐng)
文檔簡(jiǎn)介
1、背景:急性心肌梗死(acute myocardial infarction,AMI)是世界范圍內(nèi)死亡率較高的疾病之一。及時(shí)恢復(fù)(再灌注)缺血心肌的血流供應(yīng)成為治療這些患者的標(biāo)準(zhǔn)療法。然而在早期階段再灌注會(huì)給心肌組織帶來(lái)進(jìn)一步更嚴(yán)重的損傷即缺血再灌注(ischemia/reperfusion,I/R)損傷。研究發(fā)現(xiàn)缺血預(yù)適應(yīng)有著明顯的心肌保護(hù)作用,但是由于急性心梗的不可預(yù)知性其臨床應(yīng)用受到限制。近年來(lái)缺血后適應(yīng)(ischemic post
2、conditioning,IPostC)由于和預(yù)適應(yīng)有著相似的心肌保護(hù)作用以及臨床可操作性受到了廣泛關(guān)注,但其作用機(jī)制尚未完全清楚,有必要進(jìn)一步完善研究。
據(jù)報(bào)道自噬參與心肌I/R的發(fā)展過程。也有研究表明自噬受到后適應(yīng)的調(diào)節(jié)。再灌注早期大量生成的活性氧(reactive oxygen species,ROS)引發(fā)誘導(dǎo)的自噬同時(shí)也能夠降低ROS水平,減輕氧化應(yīng)激。我們實(shí)驗(yàn)室前期研究發(fā)現(xiàn),神經(jīng)元型一氧化氮合酶(neuronal n
3、itric oxide synthase,nNOS)參與后適應(yīng)減輕氧化應(yīng)激和鈣超載,具有抑制I/R損傷的心肌保護(hù)作用。后適應(yīng)能夠恢復(fù)nNOS活性,其合成的NO影響腺苷單磷酸激活蛋白激酶(adenosine5'-monophosphate(AMP)-activated protein kinase,AMPK)的活性,從而對(duì)哺乳動(dòng)物雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycinm,mTOR)即自噬的關(guān)鍵調(diào)節(jié)器產(chǎn)生
4、作用。但是自噬、后適應(yīng)與nNOS之間在缺血再灌注損傷及保護(hù)作用中的相互關(guān)系尚未明晰。我們推測(cè)nNOS可能參與后適應(yīng)對(duì)自噬的調(diào)節(jié),后適應(yīng)可能部分通過nNOS介導(dǎo)的通路促進(jìn)自噬減輕I/R損傷。
目的:研究自噬在后適應(yīng)心肌保護(hù)中的作用,探討nNOS在缺血后適應(yīng)調(diào)控自噬活性中的作用。
方法:隨機(jī)選擇C57/B6雄性小鼠,建立小鼠在體心臟缺血再灌注損傷模型與缺血后適應(yīng)模型;用缺氧罐建立H9c2心肌細(xì)胞缺氧/復(fù)氧損傷模型與缺氧后
5、適應(yīng)模型;用Western Blot檢測(cè)組織和細(xì)胞樣本中各組LC3-Ⅱ、LC3-Ⅰ、p62、p-AMPK(Thr172)、p-mTOR、p-nNOS(Ser852)以及nNOS蛋白的表達(dá)含量;用透射電鏡觀察各組樣本中自噬體個(gè)數(shù)及線粒體形態(tài)。用共聚焦顯微鏡觀察被GFP-LC3腺病毒轉(zhuǎn)染的各組細(xì)胞中自噬體個(gè)數(shù);用TTC試劑盒測(cè)定心肌梗死面積;利用HE染色對(duì)心肌組織結(jié)構(gòu)進(jìn)行觀察測(cè)定;利用ROS試劑盒檢測(cè)細(xì)胞中ROS生成量;使用Annexin
6、V-FITC/PI凋亡檢測(cè)試劑盒測(cè)定細(xì)胞凋亡率;用CCK-8試劑盒測(cè)定細(xì)胞活性;用線粒體膜電位檢測(cè)試劑盒測(cè)定各組細(xì)胞的線粒體膜電位。
結(jié)果:1)與I/R組相比,IPostC組nNOS活性恢復(fù)。2)后適應(yīng)增加了自噬體的形成,恢復(fù)了受損的自噬流,自噬活性升高;nNOS抑制劑L-VNIO削弱了后適應(yīng)這一作用。3)與I/R組相比,IPostC組AMPK磷酸化水平進(jìn)一步增加,mTOR磷酸化水平降低;nNOS抑制劑L-VNIO抑制了后適應(yīng)
溫馨提示
- 1. 本站所有資源如無(wú)特殊說明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請(qǐng)下載最新的WinRAR軟件解壓。
- 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請(qǐng)聯(lián)系上傳者。文件的所有權(quán)益歸上傳用戶所有。
- 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網(wǎng)頁(yè)內(nèi)容里面會(huì)有圖紙預(yù)覽,若沒有圖紙預(yù)覽就沒有圖紙。
- 4. 未經(jīng)權(quán)益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
- 5. 眾賞文庫(kù)僅提供信息存儲(chǔ)空間,僅對(duì)用戶上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護(hù)處理,對(duì)用戶上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯,并不能對(duì)任何下載內(nèi)容負(fù)責(zé)。
- 6. 下載文件中如有侵權(quán)或不適當(dāng)內(nèi)容,請(qǐng)與我們聯(lián)系,我們立即糾正。
- 7. 本站不保證下載資源的準(zhǔn)確性、安全性和完整性, 同時(shí)也不承擔(dān)用戶因使用這些下載資源對(duì)自己和他人造成任何形式的傷害或損失。
最新文檔
- 硫化氫通過增強(qiáng)自噬減輕腎缺血再灌注損傷.pdf
- 橙皮素后處理通過抑制自噬與凋亡減輕心肌缺血再灌注損傷.pdf
- 硫化氫通過抑制自噬減輕心肌缺血再灌注損傷的實(shí)驗(yàn)研究.pdf
- 心肌缺血和缺血再灌注損傷
- Dexpramipexole通過PINK1-Parkin通路調(diào)節(jié)線粒體自噬減輕心肌缺血再灌注損傷及其機(jī)制.pdf
- 虎狀苷后處理促進(jìn)自噬流減輕心肌缺血再灌注損傷.pdf
- 白藜蘆醇通過SIRT途徑抑制自噬減弱心肌缺血再灌注損傷.pdf
- 遠(yuǎn)處后適應(yīng)—肺短暫缺血再灌注對(duì)兔急性心肌缺血再灌注損傷的作用.pdf
- 長(zhǎng)鏈非編碼RNA-HRIM通過自噬通路調(diào)控心肌缺血再灌注損傷的初步研究.pdf
- 褪黑素通過增強(qiáng)自噬保護(hù)缺血再灌注損傷的N2a.pdf
- 遠(yuǎn)隔缺血后適應(yīng)(RIPostC)對(duì)心肌缺血再灌注損傷的作用及機(jī)制研究.pdf
- 前列地爾注射液通過抑制自噬減輕肺缺血再灌注損傷.pdf
- 氫氣微泡減輕心肌缺血再灌注損傷的研究.pdf
- 自噬在心肌缺血-再灌注損傷中的不同作用.pdf
- 重組人腫瘤壞死因子受體抗體融合蛋白聯(lián)合缺血后適應(yīng)減輕大鼠心肌缺血再灌注損傷.pdf
- nNOS在小鼠心肌缺血再灌注損傷和缺血預(yù)處理中的作用機(jī)制研究.pdf
- 缺血后適應(yīng)及藥物后適應(yīng)對(duì)心肌缺血再灌注損傷的保護(hù)作用及其機(jī)制的研究.pdf
- 曲美他嗪通過激活A(yù)MPK、ERK信號(hào)通路對(duì)心肌缺血再灌注損傷的保護(hù)作用.pdf
- 細(xì)胞凋亡與心肌缺血再灌注損傷.pdf
- 丙泊酚對(duì)大鼠急性心肌缺血再灌注損傷中自噬的影響.pdf
評(píng)論
0/150
提交評(píng)論