口腔菌斑生物膜間的相互作用及其對(duì)不同材料的粘附性.pdf

1、齲病是一種最常見(jiàn)的慢性細(xì)菌感染性疾病。齲病如果沒(méi)有及時(shí)治療，病變進(jìn)一步可發(fā)展到牙髓和根尖周組織，嚴(yán)重時(shí)可影響全身健康?？谇恢械木吲c齲病密切相關(guān)，被認(rèn)為是齲病的最重要的致病因素之一。
　　變異鏈球菌已成為公認(rèn)的致齲菌，在齲病的進(jìn)程中被認(rèn)為是重要的病原因子。血鏈球菌作為口腔中的常駐菌，是口腔中比例最多的細(xì)菌，也是牙面的早期定居菌牙菌斑的優(yōu)勢(shì)細(xì)菌。牙齦卟啉單胞菌是一種革蘭氏陰性細(xì)菌，與慢性牙周炎有關(guān)。牙齦卟啉單胞菌主要憑借一些齦上菌斑

2、，例如口腔鏈球菌的作用定殖到口腔中。口腔鏈球菌和牙齦卟啉單胞菌的粘附具有多形性。牙齦卟啉單胞菌表面有長(zhǎng)短不一的菌毛，研究證明這種粘附與其相關(guān)。當(dāng)牙齦卟啉單胞菌進(jìn)入口腔與口腔鏈球菌發(fā)生粘附作用時(shí)，齦下菌斑的增殖能被齦上生物膜阻止。研究口腔菌斑間的相互粘附及抑制作用對(duì)口腔疾病的治療研究有重大意義。
　　近幾年來(lái)，口腔內(nèi)新型材料的發(fā)展有了很大的突破。除了傳統(tǒng)的玻璃離子，磷酸鋅水門(mén)汀，樹(shù)脂材料以外，牙科滲透樹(shù)脂-Icon開(kāi)始應(yīng)用于牙齒鄰面

3、及唇頰面齲損微創(chuàng)治療;生物陶瓷材料開(kāi)始應(yīng)用于根管內(nèi)的充填材料。各種口腔材料的抗菌性能及臨床應(yīng)用上如何選擇材料成了大家所關(guān)注的焦點(diǎn)。
　　本研究通過(guò)建立口腔內(nèi)主要菌種的生物膜模型，利用掃描電鏡、熒光顯微鏡觀察變異鏈球菌和血鏈球菌對(duì)牙齦卟啉單胞菌的抑制作用及對(duì)生物膜的影響。并通過(guò)模擬口腔內(nèi)生物膜形成的初始狀態(tài)，即牙齦卟啉單胞菌粘附于齦上與口腔鏈球菌形成齦上菌斑后，發(fā)現(xiàn)牙齦卟啉單胞菌粘附各種不同口腔材料的能力，進(jìn)一步揭示齦上生物膜阻止齦

4、下菌斑增殖的現(xiàn)象，比較細(xì)菌粘附不同口腔材料能力的不同。選取了常見(jiàn)的齦上菌斑細(xì)菌-變異鏈球菌和粘性放線菌;常見(jiàn)的齦下菡斑細(xì)菌-牙齦卟啉單胞菌和糞腸球菌。采取多個(gè)時(shí)間段來(lái)觀察細(xì)菌粘附各種材料性能的不同及其生物膜的形成，從而揭示了在體外環(huán)境下不同口腔修復(fù)材料及根管充填材料對(duì)齦上及齦下菌斑粘附性能的區(qū)別。最后建立人體內(nèi)各種不同口腔充填材料的新型菌斑生物膜模型，采用DNA提取，Miseq測(cè)序，生物學(xué)信息分析的方法比較不同材料上細(xì)菌生物膜形成情況，

5、分析不同材料上各種細(xì)菌的種類及豐度。
　　通過(guò)研究發(fā)現(xiàn)變異鏈球菌和血鏈球菌菌液濃度在1.5×108 CFU/ml時(shí)對(duì)牙齦卟啉單胞菌的定殖有抑制效果。變異鏈球菌和血鏈球菌濃度在3×108 CFU/ml時(shí)候?qū)ρ例l卟啉單胞菌的抑菌效果比濃度為1.5×108 CFU/ml更明顯。血鏈球菌上清液/變異鏈球菌上清液均能抑制牙齦卟啉單胞菌生物膜的形成，而且血鏈球菌上清液比變異鏈球菌上清液更能抑制牙齦卟啉單胞菌生物膜的形成。樹(shù)脂材料塊與AH-Pl

6、us材料塊表面有大量牙齦卟啉單胞菌粘附。MTA、玻璃離子、Icon、iRoot-SP、BP、FS材料塊表面牙齦卟啉單胞菌粘附的數(shù)量較少。樹(shù)脂材料塊與磷酸鋅水門(mén)汀材料塊表面變異鏈球菌粘附的數(shù)量最多，而玻璃離子材料塊和Icon材料塊表面變異鏈球菌粘附的數(shù)量較少。樹(shù)脂材料塊與磷酸鋅水門(mén)汀材料塊表面粘性放線菌粘附的數(shù)量較多，而Icon材料塊和玻璃離子材料塊表面粘性放線菌粘附的數(shù)量較少。AH-Plus材料塊表面牙齦卟啉單胞菌粘附的數(shù)量最多，而MT

7、A材料塊表面牙齦卟啉單胞菌粘附的數(shù)量最少。AH-Plus材料塊表面糞腸球菌粘附的數(shù)量最多，而iRoot-FS材料塊表面糞腸球菌粘附的數(shù)量最少。體內(nèi)模型的生物信息學(xué)研究發(fā)現(xiàn)玻璃離子和Icon滲透樹(shù)脂預(yù)防繼發(fā)齲的性能優(yōu)于磷酸鋅水門(mén)汀和Z350樹(shù)脂。
　　本研究利用掃描電鏡、熒光顯微鏡觀察生物膜中菌種間的相互抑制作用，為闡述變異鏈球菌、血鏈球菌、牙齦卟啉單胞菌的相互作用機(jī)制打下了基礎(chǔ);將最近幾年的口腔內(nèi)新型材料:Icon、MTA、iRo