重組血紅密孔菌漆酶的固定化及其染料脫色中的應(yīng)用.pdf

1、本文在前期血紅密孔菌漆酶基因在畢赤酵母中表達(dá)基礎(chǔ)上，研究了重組漆酶對(duì)不同化學(xué)結(jié)構(gòu)染料的脫色能力及固定化漆酶酶學(xué)性質(zhì)。主要研究結(jié)果如下:
　　1.重組漆酶在無(wú)介體存在下只能對(duì)IC（靛紅）有較好的脫色效果，介體的加入能顯著提升染料脫色的速率和脫色程度，Syr是添加的所有介體中，導(dǎo)致漆酶脫色效果最明顯的，靛紅在Syr的介導(dǎo)下基本能完全脫色，而RBBR和RB5的脫色率也在60％以上。重組漆酶在酸性條件下對(duì)三種染料脫色效果較好。選取pH5.

2、0做后續(xù)實(shí)驗(yàn)，漆酶在進(jìn)行染料脫色時(shí)最適溫度范圍較寬，三種染料在20～60℃下都表現(xiàn)出較好的降解效果。通過(guò)正交試驗(yàn)得到三種混合染料脫色最優(yōu)方案:RBBR濃度為100 mg/L、RB5濃度為40 mg/L、IC濃度為62.5 mg/L、粗酶液濃度為1 U/mL、介體濃度0.5 mM，混合染料在最優(yōu)方案條件下脫色率達(dá)93％，顯示出該重組漆酶在染料廢水處理中具有較好的應(yīng)用前景。
　　2.固定化重組漆酶在酸性條件下以ABTS作為底物時(shí)，最適

3、pH為3.8，在不同pH下保存lh后酶活明顯提高。此外，固定化酶在60℃下酶活最高，在20～60℃下保溫1h后其酶活同樣顯著增加，說(shuō)明固定化酶有較好的pH穩(wěn)定性和熱穩(wěn)定性。二甲基亞砜對(duì)固定化酶活抑制最明顯，Mn2+和Ba2+對(duì)固定化重組漆酶活性促進(jìn)作用最為明顯，而Na+、Li+和Hg2+對(duì)其有較小的抑制作用。固定化漆酶可在常溫下保存12 d后依然保持51％漆酶活性。
　　3.固定后的重組漆酶在Syr存在下對(duì)RBBR、RB5和IC三