桂皮醛、丹皮酚對(duì)根管內(nèi)白色念珠菌抑菌效果的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的:
　　本實(shí)驗(yàn)采用因正畸需要拔除的新鮮人單根管前磨牙標(biāo)本建立白色念珠菌感染模型。選用桂皮醛、1mg/ml丹皮酚溶液為根管消毒試驗(yàn)藥物，并以根管內(nèi)消毒藥物甲醛甲酚作為對(duì)照，觀察兩種中藥對(duì)根管內(nèi)白色念珠菌的抑菌效果，以期為治療失敗的感染根管尋找安全、有效的治療藥物。
　　方法:
　　1、白色念珠菌感染根管模型的建立
　　收集60顆因正畸需要新鮮拔除的人單根管前磨牙，隨機(jī)分為5組，1組為空白對(duì)照組，1組為實(shí)驗(yàn)對(duì)照組

2、，3組為實(shí)驗(yàn)組，每組12顆。在牙頸部距根尖12mm處切除離體牙牙冠部分，保留牙根。進(jìn)行常規(guī)拔髓及根管預(yù)備。根管預(yù)備采用機(jī)動(dòng)（登士柏機(jī)用根管馬達(dá)）(08錐度)Protaper器械進(jìn)行，先用SX敞開根管口，然后按照S1、S2、F1、F2的順序進(jìn)行根管預(yù)備到25號(hào)，過程中每更換一次器械，即用分別裝有MTAD和2.5％次氯酸鈉溶液的注射器安裝23號(hào)側(cè)向開口針頭交替提拉沖洗根管，預(yù)備完成后另以注射器裝生理鹽水，大劑量快速在根管內(nèi)沖洗。然后，全部離

3、體牙用超聲蕩洗，干燥。用3M P60復(fù)合樹脂封閉根尖孔及根尖孔上2mm部分。
　　將5組制備好的離體牙放入裝有沙氏液體培養(yǎng)基的容器中，121℃高溫高壓下抑菌20min,靜置在5％CO2電熱恒溫培養(yǎng)箱(37℃)內(nèi)，如培養(yǎng)液在24h后無混濁，即認(rèn)定抑菌完全。
　　復(fù)蘇并鑒定白色念珠菌，將復(fù)蘇的白色念珠菌標(biāo)準(zhǔn)菌株用比濁儀將其調(diào)整成濁度為0.5M的標(biāo)準(zhǔn)菌液。3組實(shí)驗(yàn)組和1組實(shí)驗(yàn)對(duì)照組離體牙標(biāo)本培養(yǎng)液中分別放入白色念珠菌菌懸液0.1m

4、l，靜置在5％CO2電熱恒溫培養(yǎng)箱(37℃)內(nèi)，7d后取出離體牙標(biāo)本，鑒定真菌種類，確定無雜菌生長。成功建立白色念珠菌根管感染模型。
　　2、不同藥物干預(yù)白色念珠菌感染根管模型
　　3、組實(shí)驗(yàn)組分別以無菌棉捻沾取桂皮醛、1mg/ml丹皮酚溶液、甲醛甲酚(約0.2ul)放入根管內(nèi)以Caxiton暫封;實(shí)驗(yàn)對(duì)照組及空白對(duì)照組封入生理鹽水無菌棉捻。用石蠟將封好的標(biāo)本根尖向下固定于細(xì)菌培養(yǎng)皿中，靜置在37℃電熱恒溫培養(yǎng)箱內(nèi)，分別于封

5、藥3d和封藥7d，每組取出6顆標(biāo)本，去除暫封取出根管內(nèi)藥捻，蒸餾水沖洗根管內(nèi)殘存藥物后干燥根管。無菌條件下，用25號(hào)H銼均勻磨取根管內(nèi)層牙本質(zhì)粉末，進(jìn)行取樣和菌落培養(yǎng)計(jì)數(shù)，做統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。同時(shí)，進(jìn)行快速革蘭氏染色，生物顯微鏡下鑒定沙氏液體培養(yǎng)液試管內(nèi)的細(xì)菌種類，確定無雜菌生長。
　　結(jié)果:
　　1、封藥前細(xì)菌培養(yǎng)計(jì)數(shù)結(jié)果顯示，空白對(duì)照組無真菌菌落生長，其他各組根管內(nèi)真菌數(shù)量無差異（P＞0.05）。
　　2、封藥3d，桂皮

6、醛組、甲醛甲酚組根管內(nèi)真菌數(shù)量較陽性對(duì)照組明顯減少(P＜0.05)，且桂皮醛組少于甲醛甲酚組(P＜0.05)(Fig.6，F(xiàn)ig.8)。1mg/ml丹皮酚溶液組與陽性對(duì)照組比較無明顯差異(P＞0.05)(Fig.5，F(xiàn)ig.7)。
　　3、封藥7d，桂皮醛組、甲醛甲酚組根管內(nèi)無真菌生長(P＜0.05）(Fig.10，F(xiàn)ig.12)。1mg/ml丹皮酚溶液組真菌數(shù)量較陽性對(duì)照組明顯減少(P＜0.05)(Fig.9, Fig.11)。