續(xù)隨子中活性成分分析及提取工藝優(yōu)化.pdf

1、續(xù)隨子（Euphorbia lathyris L.）為大戟科大戟屬植物，我國(guó)很早就有栽培，廣泛分布于全國(guó)10余個(gè)省。續(xù)隨子有油脂、藥用、觀賞及農(nóng)藥用植物等多種用途，有較高利用價(jià)值。其莖、根和種子均可入藥，有逐水消腫，破血消癥功效。本文通過比較索氏法、超聲法、水酶法對(duì)續(xù)隨子種子油的提取效率，選出最佳提取方法。在單因素試驗(yàn)基礎(chǔ)上，采用Plackett-Burman設(shè)計(jì)篩選索氏提取法中影響提取率的因素。以種子油提取率作為響應(yīng)目標(biāo)，對(duì)篩選出的因

2、素通過中心復(fù)合設(shè)計(jì)(Central Composite Design)進(jìn)行優(yōu)化，確定索氏提取法的最優(yōu)提取工藝。采用氣相色譜-質(zhì)譜法(G C-M S)分析種子油成分。為建立高效液相色譜法同時(shí)測(cè)定續(xù)隨子中酚酸類化合物（沒食子酸、綠原酸、咖啡酸、香草酸、ρ-香豆酸、阿魏酸）和黃酮類化合物（蘆丁、白藜蘆醇、槲皮素、山奈酚、黃芩素、漢黃芩素）的方法。采用高效液相色譜法在同一色譜條件下分別對(duì)續(xù)隨子根、莖、種子和種皮中多酚類物質(zhì)的種類和含量進(jìn)行了定量

3、測(cè)定。通過測(cè)定續(xù)隨子清除DPPH自由基能力、三價(jià)鐵還原抗氧化能力（FRAP）和過氧化氫自由基清除能力（PSC Assay），綜合評(píng)價(jià)了續(xù)隨子的抗氧化活性。通過實(shí)驗(yàn)，我們獲得以下結(jié)果：
　　1.確定續(xù)隨子種子油的最優(yōu)提取工藝，并對(duì)其脂肪酸成分進(jìn)行分析，結(jié)果表明：三種方法的最高得率分別為41.97％，36.38%，34.33%。提取溶劑、液料比、溫度、時(shí)間為影響最明顯的因素。確定了索氏提取法的最優(yōu)提取工藝為：提取溶劑石油醚，液料比30

4、:1(mL/g)，提取溫度90℃，提取時(shí)間9 h。采用氣質(zhì)聯(lián)用法分析續(xù)隨子種子油的脂肪酸組成，鑒定出8種，占總脂肪酸含量的99%以上。其中，不飽和脂肪酸含量占總脂肪酸90%以上，主要有油酸、亞油酸、α-亞麻酸等。在上述最優(yōu)工藝條件下，種子油得率理論值為54.35%，實(shí)測(cè)值為54.18%，與理論值相比，相對(duì)誤差為0.12%。研究結(jié)果可為續(xù)隨子種子油的提取工藝提供參考，為續(xù)隨子的進(jìn)一步開發(fā)利用建立基礎(chǔ)。
　　2.采用高效液相色譜法在同

5、一色譜條件下分別對(duì)續(xù)隨子根、莖、種子和種皮中多酚類物質(zhì)的種類和含量進(jìn)行了定量測(cè)定。結(jié)果表明六種酚酸類化合物和六種黃酮類化合物的質(zhì)量濃度分別在1～300 mg/L、0.5～300 mg/L范圍內(nèi)與峰面積線性關(guān)系良好，相關(guān)系數(shù)R2均大于0.9993，平均加樣回收率在91.21%～116.54%，RSD均小于5.15%。試驗(yàn)結(jié)果均滿足分析要求，所建立的方法可在同一色譜條件下檢測(cè)6個(gè)成分，操作簡(jiǎn)便，精密度高，重現(xiàn)性好，可用于續(xù)隨子酚酸類化合物的

6、測(cè)定。
　　3.續(xù)隨子不同部位的提取物有較強(qiáng)的抗氧化能力，清除DPPH自由基的IC50分別為莖自由酚（246.02μg/mL），莖結(jié)合酚（305.08μg/mL），根自由酚（465.35μg/mL），根結(jié)合酚（325.20μg/mL）種子自由酚（451.66μg/mL），種子結(jié)合酚（123.95μg/mL），種皮自由酚（48.66μg/mL）。續(xù)隨子不同部位多酚提取物還原能力強(qiáng)弱為(mg FeSO4/100 g DW):種子結(jié)合酚

7、（1972.43±52.13）＞根自由酚（1807.50±17.09）＞莖自由酚（105.71±1.51）＞莖結(jié)合酚（71.39±2.95）＞種皮自由酚（69.29±4.92）＞種皮結(jié)合酚（44.86±0.13）＞根結(jié)合酚（37.69±4.69）。莖自由酚清除過氧化氫自由基EC50為28.32 mg/mL，莖結(jié)合酚EC50為15.08 mg/mL。莖自由酚的抗氧化能力為0.68μmol of Vit. C equiv./100 g DW