一種近紅外光響應(yīng)的線粒體靶向納米石墨烯基光致免疫復(fù)合物的構(gòu)建及其抗癌效應(yīng)研究.pdf

1、腫瘤光療，包括光動力療法(PDT)和光熱療法，具有微創(chuàng)、毒副作用小、無耐藥性等優(yōu)點而倍受研究者關(guān)注。尤其是近紅外光(Near-infrared light, NIR)介導(dǎo)的光療由于其較高的組織穿透深度，療效更佳。PDT重要的作用靶點是線粒體，定位于線粒體的光敏劑具有更顯著的抗腫瘤活性。光療還可以引發(fā)病灶的局部炎癥反應(yīng)和長期免疫響應(yīng)，然而，單一光療引起腫瘤免疫治療效果并不顯著；免疫佐劑CpG-ODN的輔助可進一步增強抗腫瘤免疫響應(yīng)，在聯(lián)合

2、治療方面具有重要的研究價值。當前，結(jié)合納米載體構(gòu)建靶向性的多功能納米復(fù)合藥物用于腫瘤光療和免疫聯(lián)合治療，正成為腫瘤高效治療的策略之一。
　　本課題旨在構(gòu)建一種 NIR光響應(yīng)的基于納米石墨烯的光敏免疫復(fù)合物，用于腫瘤高效聯(lián)合治療。通過疏水作用將磷脂酰乙醇胺-氨基聚乙二醇(DSPE-PEG-NH2)-(5-羧基戊基)三苯基溴化磷(TPP)線粒體靶向共聚物結(jié)合到納米氧化石墨烯表面得到GT載體，熱重分析結(jié)果得出DSPE-PEG-TPP重量

3、比為34％；通過邁克爾加成反應(yīng)合成DSPE-PEG-CpG共聚物，并負載到GT表面，進一步通過π-π堆積方式負載光敏劑新吲哚菁綠(IR820)，得到線粒體靶向的光致免疫復(fù)合物 GT/DP-CpG/IR820(CpG最大載藥率為12%,IR820最大載藥率30%)；GT/DP-CpG/IR820具有良好的生物相容性、較高的單線態(tài)氧產(chǎn)率和光熱效應(yīng)。體外實驗結(jié)果表明，GT/DP-CpG/IR820能將光敏藥物高效輸送到小鼠乳腺癌細胞EMT6的

4、線粒體內(nèi)，在808 nm激光照射下，GT/DP-CpG/IR820的體外光療效率明顯高于非靶向性的GP/DP-CpG/IR820復(fù)合物，其產(chǎn)生的單線態(tài)氧對亞細胞器線粒體具有顯著增強的破壞作用。同時，GT/DP-CpG/IR820納米復(fù)合物能有效刺激RAW264.7分泌TNF-α、IL-6、IFN-γ等促炎因子，而對抑炎因子IL-10的分泌無明顯影響。活體實驗結(jié)果表明，與單一光敏復(fù)合物GT/DP-CpG或免疫復(fù)合物GT/IR820相比，G