烏司他丁對氧化損傷海馬神經(jīng)元線粒體膜電位及凋亡相關(guān)蛋白BCL-2、MCU的影響.pdf

1、中圖分類號：中圖分類號：R89；R36；R39碩士學位論文烏司他丁對氧化損傷海馬神經(jīng)元線粒體膜電位及凋亡相烏司他丁對氧化損傷海馬神經(jīng)元線粒體膜電位及凋亡相關(guān)蛋白關(guān)蛋白BCLBCL2、MCUMCU的影響的影響院（系）、所院（系）、所臨床醫(yī)學院研究生姓名研究生姓名王平學科、專學科、專業(yè)神經(jīng)病學導師姓導師姓名陳秀教授二〇一七年三〇一七年三月西南醫(yī)科大學碩士學位論文烏司他丁對氧化損傷海馬神經(jīng)元線粒體膜電位及凋亡相關(guān)蛋白烏司他丁對氧化損傷海馬神經(jīng)

2、元線粒體膜電位及凋亡相關(guān)蛋白BCL2、MCU的影響的影響摘要目的：探討烏司他丁對氧化損傷海馬神經(jīng)元線粒體能量代謝、膜電位變化，以及凋亡相關(guān)蛋白B細胞淋巴瘤白血病2蛋白（BCL2）、線粒體鈣單向轉(zhuǎn)運蛋白（MCU）的影響和可能的機制。方法：分離SD胎鼠海馬，采用無血清培養(yǎng)原代海馬神經(jīng)元，取培養(yǎng)至第9天的神經(jīng)元，采用H2O2建立氧化應激損傷模型，分為空白對照組（N），H2O2組（H），烏司他丁預處理1000umlH2O2組（UTI1H），烏司

3、他丁預處理2000umlH2O2組（UTI2H），倒置相差顯微鏡觀察神經(jīng)元形態(tài)的改變，酶標儀檢測神經(jīng)元的NaKATP酶和Ca2Mg2ATP酶活性；熒光顯微鏡觀察JC1法檢測線粒體膜電位變化；AnnexinVFluesceinPI雙染法和Hoechst33342PI雙染法測神經(jīng)元凋亡率；采用RTPCR及Westernblot檢測BCL2、MCU蛋白的表達。結(jié)果：1、采用無血清培養(yǎng)原代海馬神經(jīng)元生長良好，培養(yǎng)814天的神經(jīng)元長勢最好，細胞核

4、立體感強，軸突聯(lián)接成網(wǎng)絡，神經(jīng)元純度為92.05%，滿足實驗要求。2、各組形態(tài)改變，H組可見神經(jīng)元胞漿濃縮，細胞核邊集，胞間隙增大，軸突斷裂，少部分細胞懸浮。UTI1H和UTI2H組可見細胞保持完整形態(tài)，部份細胞皺縮，胞體有光暈。3、ATP酶的測定：與N組比較，H組NaKATP酶、Ca2Mg2ATP酶活性降低（P?0.05），與H組比較，UTI1H和UTI2H組NaKATP酶、Ca2Mg2ATP酶活性升高（P?0.05），UTI1H和U