多胺類組蛋白去乙酰化酶抑制劑的篩選及抗肺癌作用研究.pdf

1、肺癌（lung ca ncer）是最常見的惡性腫瘤之一。據(jù)文獻統(tǒng)計，全球肺癌的發(fā)病率12.7％，死亡率18.1%。中國肺癌發(fā)病率24.7%，死亡率30.0%，居世界首位，嚴重威脅我國人民健康。目前肺癌治療仍然缺乏有效藥物，尤其是肺鱗癌。篩選發(fā)現(xiàn)安全有效的肺癌治療藥物成為亟待解決的公共衛(wèi)生問題。
　　本研究采用基于組蛋白去乙?；敢种谱饔玫姆肿訉佑嬎銠C虛擬篩選、質譜核磁共振分析和體外活性評價等技術，以胱胺和精胺為先導化合物，通過衍

2、生物的合成，進行抗肺癌作用初步評價，獲得如下研究結果：
　　1.建立了組蛋白去乙?；敢种苿┨摂M篩選方法
　　從蛋白質晶體數(shù)據(jù)庫PDB中，選擇HDAC第Ⅰ類中的HDAC2作為抗腫瘤的受體靶標。通過在胱胺和精胺分子兩端引入苯環(huán)、噻吩、呋喃和吡咯等基團，共設計51個多胺類結構的衍生物。以已上市的組蛋白去乙?；敢种苿┪鬟_本胺（CS055）作為陽性對照。用Sybyl-X2.0軟件將受體蛋白與配體庫化合物進行分子對接試驗。綜合分子對

3、接評分，發(fā)現(xiàn)6個化合物對組蛋白去乙?；敢种谱饔迷u分超過陽性對照藥物。
　　2.完成了的6個化合物候選化合物的合成制備及結構確證
　　采用精胺和胱胺分別與芳香醛、噻吩醛、呋喃醛和吡咯醛進行加成反應，并還原的合成路線來制備候選化合物。分析產物核磁共振及質譜數(shù)據(jù)，完成了候選6個化合物結構確證。它們分別為N,N’-(二硫基-2,1-二乙基)雙(2-噻吩甲胺)（1b）；N,N’-(二硫基-2,1-二乙基)雙(2-氟苯甲胺)（2b）；

4、N,N’-(二硫基-2,1-二乙基)雙(2-呋喃甲胺)（3b）；1,16,-2-(2-吡咯)-2,6,11,15-四氮雜十六烷（4b）；1,16,-2-(2-呋喃)-2,6,11,15-四氮雜十六烷（5b）；1,16,-2-(4-羥基苯基)-2,6,11,15-四氮雜十六烷（6b）。
　　3.發(fā)現(xiàn)了4化合物個對肺鱗癌細胞有較好抑制作用
　　采用CCK-8法，以西達本胺為陽性對照藥物，進行候選化合物對肺鱗癌細胞NCI-H520

5、和正常人肺支氣管上皮細胞16HBE的體外抑制試驗，篩選NCI-H520細胞和16BHE細胞各自合適的細胞密度和加入CCK-8后的培養(yǎng)時間，考察候選化合物在7個給藥濃度0.1、1.0、10、25、50、100、120μMoL/L，作用24 h的抑制效果，并計算其半數(shù)抑制濃度（IC50）。實驗發(fā)現(xiàn)，NCI-H520細胞在96孔板中的接種密度2500個/孔，培養(yǎng)1～3day，加入CCK-8繼續(xù)培養(yǎng)1h后其OD值在0.85～1.13范圍內，16

6、HBE細胞在96孔板中的接種密度5000個/孔，培養(yǎng)1～3day，加入CCK-8繼續(xù)培養(yǎng)2h后其OD值在1.05～1.59范圍內；選擇9個化合物及陽性藥：1、2、3、4、5、6、10、12、14、19，對NCI-H520的IC50值分別為222、152、369、5、12、9、2822、157、143、45μMoL/L，對16HBE的IC50值分別為201、96、80、71、2076、30、2923、143、711、39μMoL/L。發(fā)現(xiàn)