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文檔簡介
1、目的:
研究BMP-2促進(jìn)骨質(zhì)疏松性成骨細(xì)胞成骨過程中VEGF的作用機(jī)制,為BMP-2用于臨床防治骨質(zhì)疏松及其并發(fā)癥提供理論依據(jù)。
方法:
將6月齡雌性SD大鼠切除雙側(cè)卵巢自由飼養(yǎng)90天,分別測量去勢大鼠(實(shí)驗(yàn)組)與未做任何處理大鼠(對照組)全身骨密度。在無菌條件下分離大鼠雙側(cè)股骨,提取骨質(zhì)疏松性大鼠BMSCs并運(yùn)用貼壁法進(jìn)行培養(yǎng)。取第4代細(xì)胞進(jìn)行成骨誘導(dǎo),并加入最佳濃度的rhBMP-2,同時(shí)分別加入不同濃
2、度的VEGF反義寡核苷酸(ASODNs)、蘇拉明和外源性VEGF進(jìn)行分組干預(yù),繼續(xù)培養(yǎng)2天后檢測堿性磷酸酶ALP活性,18天后統(tǒng)計(jì)礦化結(jié)節(jié)形成數(shù)目。
結(jié)果:
1、對照組大鼠骨密度為0.179±0.006g/cm2,而實(shí)驗(yàn)組去勢大鼠骨密度為0.158±0.007 g/cm2。兩者差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=4.180,P<0.05)。2、實(shí)驗(yàn)組加入rhBMP-2與對照組相比,其鈣結(jié)節(jié)形成和ALP活性均顯著升高。3、VEGF
3、ASODNs組和蘇拉明組,其鈣結(jié)節(jié)形成和ALP活性分別隨其劑量增加而降低。外源性VEGF組,其濃度改變對鈣結(jié)節(jié)形成和ALP活性幾乎沒有影響。
結(jié)論:
1、6月齡雌性SD大鼠經(jīng)去卵巢處理后全身骨密度明顯下降。2、BMP-2可以促進(jìn)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞向成骨細(xì)胞分化。3、外源性VEGF不能單獨(dú)促進(jìn)成骨細(xì)胞的成骨能力,而對BMP-2促進(jìn)成骨能力也沒有影響。VEGF可能以自分泌的形式分泌某種物質(zhì),而這種物質(zhì)促進(jìn)BMP-2的誘導(dǎo)成
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