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1、同步熒光技術(shù)具有簡(jiǎn)化譜圖、減少光散射、提高選擇性等優(yōu)勢(shì),適合于多組分混合物的分析。該技術(shù)近幾年與具有較好“數(shù)學(xué)分離”功能的化學(xué)計(jì)量學(xué)方法相結(jié)合,能更好地以“光譜分辨”結(jié)合“數(shù)學(xué)分離”克服多組分體系中光譜嚴(yán)重重疊這一難題,從而在復(fù)雜體系的解析中得到越來越廣泛應(yīng)用。本論文致力于發(fā)展簡(jiǎn)便快速,并能同時(shí)測(cè)定血液中多種卟啉的同步熒光分析方法,通過結(jié)合導(dǎo)數(shù)技術(shù)消除基體干擾或化學(xué)計(jì)量學(xué)方法來解決多重共線問題。論文分為四章: 第一章是文獻(xiàn)綜述。
2、首先介紹卟啉作為生物標(biāo)志物的應(yīng)用價(jià)值以及卟啉的分析方法;然后闡述了同步熒光法的理論基礎(chǔ)、發(fā)展和應(yīng)用以及同步熒光技術(shù)結(jié)合化學(xué)計(jì)量學(xué)方法研究進(jìn)展;最后提出了本論文的研究設(shè)想。 第二章綜合考察熒光強(qiáng)度,穩(wěn)定性及萃取全血中卟啉的可行性等影響因素,得出N,N-二甲基甲酰胺是一種非常穩(wěn)定的且能用于測(cè)定全血中卟啉的新型溶劑的結(jié)論。利用該溶劑萃取全血中的卟啉,建立了同時(shí)測(cè)定全血中痕量鋅原卟啉和原卟啉的三維熒光-交替三線性分解算法和導(dǎo)數(shù)恒基體同步
3、熒光法,并考察了兩種方法的檢測(cè)限、精密度和加標(biāo)回收率。實(shí)際全血中兩種方法的平均回收率:前者為(82±9)%,后者為(85±10)%,且兩種方法測(cè)定20份全血樣時(shí)獲得的相關(guān)性良好。 第三章提出了非線性可變角同步熒光技術(shù)結(jié)合偏最小二乘法來同時(shí)分析全血中的原卟啉、尿卟啉和糞卟啉。該法一次光譜掃描只需30s,簡(jiǎn)便快速。三種卟啉的檢測(cè)限依次為:0.40、0.20和0.15nmol/L。實(shí)際全血樣中的平均回收率分別是原卟啉(86.5±4.2
4、)%,尿卟啉(89.6±2.3)%和糞卟啉(89.8±3.9)%。 第四章建立了一種同時(shí)測(cè)定超微量血細(xì)胞中原卟啉、糞卟啉和鋅原卟啉的導(dǎo)數(shù)恒基體-非線性可變角同步熒光法。該法一次光譜掃描就能同時(shí)分辨出光譜嚴(yán)重重疊原卟啉、糞卟啉和鋅原卟啉,并且三者的檢測(cè)限依次為:0.58、0.21和0.05nmol/L。實(shí)際血細(xì)胞中的平均回收率分別是原卟啉(82.5±9.1)%,糞卟啉(83.5±7.8)%和鋅原卟啉(89.2±13)%。將所建立的
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